| 重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽在大肠杆菌中融合可溶表达 |
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| 引用本文： | 林陈水,陈洪. 重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽在大肠杆菌中融合可溶表达[J]. 浙江工业大学学报, 2013, 41(4): 418-421 |
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| 作者姓名： | 林陈水 陈洪 |
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| 作者单位： | 浙江工业大学药学院,浙江杭州,310032 |
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| 摘 要： | 将N-利用基质(NusA)和人骨形态发生蛋白-2成熟肽(hBMP-2m)的编码基因进行基因融合,实现了hBMP-2m在大肠杆菌中的融合可溶表达.以大肠杆菌基因组DNA为模板PCR扩增得到NusA基因,通过NdeⅠ和AflⅡ酶切位点将其置换出重组融合表达载体pDsbA-hBMP-2m中的DsbA基因,使hBMP-2m基因重组于NusA基因的下游,重组质粒转化E.coli BL21(DE3),获得工程菌.在30℃条件下,经IPTG诱导表达后,融合蛋白占细胞总蛋白的45%左右,并且主要以可溶形式存在,可溶部分达90%以上.经过简单的Ni 2+柱一步纯化即可得到纯度较高的融合蛋白.通过融合表达的方式表达出可溶性的目的蛋白,有望复性后通过肠激酶酶切得到hBMP-2m单体,进一步二聚体化得到具有生物活性的hBMP-2m.
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| 关 键 词： | 可溶性表达 骨形态发生蛋白 融合表达 NusA |
Soluble-expression of the recombinant human bone morphogenetic protein 2 mature peptide in a fused form in Escherichia coli |
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| LIN Chen-shui , CHEN Hong. Soluble-expression of the recombinant human bone morphogenetic protein 2 mature peptide in a fused form in Escherichia coli[J]. Journal of Zhejiang University of Technology, 2013, 41(4): 418-421 |
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| Authors: | LIN Chen-shui CHEN Hong |
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| Affiliation: | LIN Chen-shui;CHEN Hong;College of Pharmaceutical Science,Zhejiang University of Technology; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | soluble-expression bone morphogenetic protein fusion expression NusA |
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