苦荞芦丁水解酶的最适作用条件及Cu2+对酶活性的抑制 |
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引用本文: | 崔晓东,王转花.苦荞芦丁水解酶的最适作用条件及Cu2+对酶活性的抑制[J].食品科学,2012,33(7):223-227. |
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作者姓名: | 崔晓东 王转花 |
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作者单位: | 化学生物学与分子工程教育部重点实验室,山西大学生物技术研究所 |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(30970611;31171659);山西省科技攻关计划项目(20100321101);太原市大学生创新创业人才项目(110148025) |
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摘 要: | 干燥的苦荞麦种子粉碎后经20mmol/L的醋酸盐缓冲液抽提,Resource Q和Superdex G75 HR 10/300凝胶柱分离纯化,得到一种芦丁水解酶,测定该酶的最适作用条件,研究Cu2+对该酶的抑制作用。结果表明:苦荞芦丁水解酶的分子质量约70kD,最适作用pH值为5.0。反应体系选择20%乙醇时,可保留酶的活性不被抑制,当乙醇体积分数大于50%时,对酶的活性抑制率达90%以上,表明可选用低体积分数乙醇作为芦丁的溶剂,用于芦丁水解酶测活体系及后续槲皮素制备研究。荧光光谱表明,Cu2+与芦丁水解酶以物质的量比1:1的形成稳定的复合物,可以使酶的荧光发生猝灭,水解芦丁的活性降低。表明Cu2+对芦丁水解酶有抑制作用。
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关 键 词: | 苦荞 芦丁 槲皮素 芦丁水解酶 荧光光谱 |
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