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谷氨酸棒杆菌中L-半胱氨酸外排蛋白的鉴定及应用
作者姓名:乔晋芳  杜焕敏  刘川  祁玉婷  吴硕  徐宁  戴玉杰  邵丽  刘君
作者单位:1. 天津科技大学生物工程学院;2. 中国科学院天津工业生物技术研究所;3. 东北农业大学生命科学学院
基金项目:国家重点研发计划项目(2021YFC2100700);
摘    要:L-半胱氨酸是一种重要的含硫氨基酸,被广泛应用于食品,医药,化妆品等行业。有效的外排蛋白不仅可以降低反馈抑制和细胞毒性,还能提高菌体的生产能力。在细胞工厂的构建中发挥重要作用。该研究基于转录组测序分析,在谷氨酸棒杆菌中发现一种新的L-半胱氨酸外排蛋白Cg1298-Cg1299。当添加7.5 mmol/L L-半胱氨酸时,cg1298-cg1299缺失菌株的生长比对照菌株降低了约24.2%,而回补菌株恢复了对半胱氨酸的抗性。利用Cys-Tyr二肽进一步检测Cg1298-Cg1299对半胱氨酸的外排能力,发现cg1298-cg1299双敲菌株的L-半胱氨酸外排能力下降了26.3%。最后,在L-半胱氨酸底盘菌中过表达cg1298-cg1299使得L-半胱氨酸产量提高17.1%。综上所述,Cg1298-Cg1299是谷氨酸棒杆菌中一种新的L-半胱氨酸外排蛋白,其显著增强了谷氨酸棒杆菌对L-半胱氨酸的耐受性,并提高了L-半胱氨酸的生产能力,为将来构建高产L-半胱氨酸的细胞工厂提供了一个有效靶点。

关 键 词:L-半胱氨酸  谷氨酸棒杆菌  外排蛋白  转录组分析  Cg1298-Cg1299
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