60↑Coγ射线诱变选育聚谷氨酸高产菌株及培养基初步优化 |
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作者姓名: | 索晨 梅乐和 黄俊 盛清 |
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作者单位: | 索晨(浙江大学,化学工程与生物工程学系,浙江,杭州,310027;浙江大学,宁波理工学院,浙江,宁波,315100);梅乐和(浙江大学,化学工程与生物工程学系,浙江,杭州,310027;浙江大学,宁波理工学院,浙江,宁波,315100);黄俊(浙江大学,化学工程与生物工程学系,浙江,杭州,310027;浙江科技学院,生物与化学工程学院,浙江,杭州,310023);盛清(浙江理工大学,生命科学学院,浙江,杭州,310018) |
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基金项目: | 国家自然科学基金(30570411);国家“973”计划资助项目(2007CB714305);浙江省重点科技项目和教育部留学人员基金项目. |
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摘 要: | 对一株产γ-聚谷氨酸的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis CICC10099)进行了诱变筛选及摇瓶发酵条件的初步优化,以期得到γ-聚谷氨酸高产菌株并进一步提高其产能.实验考察了不同诱变剂量下的菌体的致死率和正突变率,以确定最佳诱变条件.结果表明60Co γ射线最佳的诱变剂量为200 Gy时,致死率大于90 %,正突变率高达13.3 %.在上述剂量下,经60Co γ射线诱变后分离筛选得到一株高产突变株Bacillus licheniformis S16, 摇瓶实验表明γ-聚谷氨酸的含量达到16.9 g·L-1,较出发菌株CICC10099提高72.4 %.并且采用单因素法初步优化了摇瓶发酵培养基,优化后的培养基组成为柠檬酸12 g·L-1,甘油80 g·L-1,氯化铵6 g·L-1,L-谷氨酸15 g·L-1,K2HPO4 1 g·L-1,CaCl2·2H2O 0.1 g·L-1 ,FeCl3·6H2O 0.05 g·L-1,MgSO4·7H2O 0.75 g·L-1,MnSO·H2O 0.1 g·L-1,pH 7.5;利用优化的培养基在250 mL三角烧瓶装液量50 mL, 37℃,180 r·min-1的条件下培养80 h,发酵液中的γ-PGA含量最高,可达到18.9 g·L-1.
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关 键 词: | 地衣芽孢杆菌 60↑Coγ射线 γ-聚谷氨酸 诱变 优化 |
文章编号: | 1003-9015(2007)05-0820-06 |
收稿时间: | 2005-10-08 |
修稿时间: | 2006-01-20 |
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