马奶酒样乳杆菌乳糖酶LacZ基因的克隆,原核表达及活性分析 |
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作者单位: | ;1.天津科技大学食品工程与生物技术学院;2.齐鲁工业大学生物工程学院 |
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摘 要: | 从开菲尔粒(Kefir)中分离出1株马奶酒样乳杆菌(Lactobacillus kefiranofaciens ZW3),具有较高的乳糖酶活性,以此菌株为材料,从其基因组中克隆得到LacZ型乳糖酶基因,该基因全长2007 bp,编码669个氨基酸。随后将该基因插入原核表达载体pET-32a中转入大肠杆菌BL21(DE3)进行过量表达,获得了其重组蛋白,纯化后分析了该重组蛋白的乳糖水解活性特点。结果显示,此蛋白在50℃,pH 7.0时乳糖水解活力最高,并在30~55℃,pH 5.0~9.0的范围仍能保持50%以上的酶活力,具有良好的工业应用潜力。
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关 键 词: | β-半乳糖苷酶 基因克隆 原核表达 |
Cloning,expression and characterization of LacZ gene from Lactobacillus kefiranofaciens |
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