氟西汀对人结膜上皮细胞TLR2/NF-κB信号通路和炎性因子的影响

目的:观察氟西汀对人结膜上皮细胞Toll样受体2（toll-like receptor 2，TLR2）/核转录因子-κB（NF-κB）信号通路和炎性因子的影响，探讨五羟色胺再摄取抑制剂（selective serotonin reuptake inhibitor，SSRI）引起干眼症的潜在机制。方法:将结膜上皮细胞分为空白对照组和药物组，药物组采用氟西汀进行干预。采用CCK-8法明确氟西汀对人结膜上皮细胞半数抑制率作为后续实验浓度。采用RT-PCR法检测TLR2、NF-κB、白细胞介素（interleukin，IL）-1β、IL-2、IL-6和肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）-α的mRNA水平；免疫荧光法和Western blot法检测TLR2和NF-κB的蛋白表达水平；ELISA法检测IL-1β、IL-2、IL-6和TNF-α的蛋白表达水平。结果:10-9～10-5mol/L范围内氟西汀对结膜上皮细胞具有增殖抑制作用，且具有浓度依赖性。RT-PCR法检测结果显示，氟西汀组TLR2、NF-κB、IL-1β、IL-2、IL-6和TNF-α mRNA水平均高于空白对照组（P＜0.05）。药物组TLR2和NF-κB的累积光密度（IOD）值明显高于空白对照组（P＜0.05），提示药物组TLR2和NF-κB蛋白表达量高于空白对照组。Western blot法检测结果显示药物组TLR2和NF-κB的蛋白表达水平均高于空白对照组（P＜0.05）。ELISA检测结果显示药物组IL-1β、IL-2、IL-6和TNF-α蛋白表达水平均高于空白对照组（P＜0.05）。结论:本研究发现氟西汀可能通过激活结膜上皮细胞TLR2/NF-κB信号通路，促进炎症因子水平，这可能是氟西汀所致干眼症潜在的生物学机制。

Effects of fluoxetine on TLR2/NF-κB signaling pathway and inflammatory factors in human conjunctival epithelial cells