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TaqMan多重实时定量PCR快速检测3种常见食源性病原菌
引用本文:艾鹏飞,王珊,高辉明,王雁伟,庞艳荣,张萌.TaqMan多重实时定量PCR快速检测3种常见食源性病原菌[J].中国食品学报,2024,24(5):373-380.
作者姓名:艾鹏飞  王珊  高辉明  王雁伟  庞艳荣  张萌
作者单位:河北科技大学食品与生物学院 石家庄 050018
基金项目:河北省重点研发计划项目(19227137D);河北省大中学生科技创新能力培育专项(22E50074D)
摘    要:建立一种可同时快速检测大肠杆菌O157:H7、单增李斯特菌和蜡样芽孢杆菌的多重实时定量PCR(qPCR)方法。依据大肠杆菌O157:H7 tir基因、单增李斯特菌mpl基因和蜡样芽孢杆菌entFM基因的保守序列分别设计特异性引物和TaqMan探针,建立多重qPCR反应体系,进行灵敏度、特异性和稳定性试验,同步检测人工染菌牛奶样品中的病原菌并与国家标准方法作对比。结果表明,建立的多重qPCR方法灵敏度高,最低检出限为12 CFU/mL;特异性强,只对3种目标菌进行PCR扩增;稳定性好,各重复性试验中Ct值的变异系数<1%;所有受污染样品阳性检出率均为100%,与国家标准方法检测结果一致,且检测周期缩短至6 h。本研究建立的TaqMan多重qPCR方法能同时快速、准确地检测乳品中的大肠杆菌O157:H7、单增李斯特菌和蜡样芽孢杆菌,为食品安全提供技术支撑。

关 键 词:TaqMan探针    多重实时定量PCR    大肠杆菌O157:H7    单增李斯特菌    蜡样芽孢杆菌
收稿时间:2023/5/26 0:00:00

Rapid Detection of Three Common Foodborne Pathogens by Multiplex Real-time Quantitative PCR Based on TaqMan Probes
Ai Pengfei,Wang Shan,Gao Huiming,Wang Yanwei,Pang Yanrong,Zhang Meng.Rapid Detection of Three Common Foodborne Pathogens by Multiplex Real-time Quantitative PCR Based on TaqMan Probes[J].Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology,2024,24(5):373-380.
Authors:Ai Pengfei  Wang Shan  Gao Huiming  Wang Yanwei  Pang Yanrong  Zhang Meng
Abstract:
Keywords:
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