西生菜中低污染量GⅡ型诺如病毒的富集与定量检测研究 |
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引用本文: | 管锦绣,许喜林,翁文川,凌 莉,刘静宇,冼钰茵.西生菜中低污染量GⅡ型诺如病毒的富集与定量检测研究[J].食品安全质量检测技术,2017,8(9):3536-3542. |
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作者姓名: | 管锦绣 许喜林 翁文川 凌 莉 刘静宇 冼钰茵 |
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作者单位: | 华南理工大学食品科学与工程学院,华南理工大学食品科学与工程学院,广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
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基金项目: | 广州市科技计划项目 (2014J4500027) |
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摘 要: | 目的优化新鲜西生菜中低污染量的GⅡ型诺如病毒富集方法,比较实时荧光RT-PCR与微滴式数字RT-PCR检测方法,研究适用于新鲜西生菜中低污染量的GⅡ型诺如病毒的定量检测方法。方法选取洗脱液种类、沉淀剂种类、沉淀剂作用温度及沉淀剂作用时间4个因素进行研究,以确定较优的GⅡ型诺如病毒富集条件。结合较优的富集条件,分别采用实时荧光RT-PCR方法和微滴式数字RT-PCR方法进行定量检测。结果病毒富集方法研究表明:洗脱液为牛肉膏-甘氨酸洗脱液、沉淀剂为PEG6000+PEG8000、沉淀剂作用温度为4℃,沉淀剂作用时间为4 h为较优条件,此时富集后的平均病毒浓度最高,平均回收率可达53.43%。实时荧光RT-PCR的检测限为1.44×10~4 copies/g;而微滴式数字RT-PCR的检测限为7.86×10~2 copies/g。结论通过优化西生菜中低污染量的GⅡ诺如病毒富集方法,比较实时荧光RT-PCR方法与微滴式数字RT-PCR方法定量检测病毒的效果,建立了适用于西生菜样品中低污染量GⅡ诺如病毒的定量检测方法。
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关 键 词: | 西生菜 GⅡ型诺如病毒 富集 实时荧光RT-PCR 微滴式数字RT-PCR |
收稿时间: | 2017/8/3 0:00:00 |
修稿时间: | 2017/8/28 0:00:00 |
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