南赤瓟醇提物通过PI3K/Akt/mTOR信号通路促进人宫颈癌Caski细胞凋亡

目的: 研究南赤瓟醇提物影响PI3K/Akt/mTOR信号通路促进人宫颈癌Caski细胞凋亡的作用机制。方法: 用南赤瓟醇提物(0.062 5、0.125、0.25、0.50、1.00、2.00 mg/mL)作用Caski细胞 24 h 后，检测其对细胞增殖的影响；然后用南赤瓟醇提物(0.25、0.50 和 1.00 mg/mL)作用Caski细胞 24 h 后，流式细胞术测定细胞周期DNA含量及亚G₁凋亡峰，ELISA试剂盒检测Caski细胞中Caspase-9和Caspase-3活性及线粒体和胞浆中细胞色素C（Cyt C）含量，Real-time PCR测定P53、Bcl 2和Bax mRNA表达，并计算Bcl-2/Bax比值，Western blot测定PI3K、Akt、mTOR磷酸化水平(p-PI3K、p-Akt、p-mTOR)，并计算p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR比值。结果: 南赤瓟醇提物对Caski细胞生长抑制作用呈明显的剂量依赖性；南赤瓟醇提物(0.25、0.50 和1.00 mg/mL)能显著抑制Caski细胞增殖，并将其阻滞于G₂/M期；可抑制p-PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白表达水平，降低p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt和p-mTOR/mTOR比值；上调P53和Bax mRNA表达，下调Bcl-2 mRNA及Bcl-2与Bax比值；降低线粒体中Cyt C含量，升高胞浆中Cyt C含量；增强Caspase-9和Caspase-3活性(P<0.05, P<0.01)。结论: 南赤瓟醇提物诱导Caski细胞凋亡的作用机制与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路磷酸化有关。