一种SUMO-Heparinase I融合酶的可溶性表达与纯化

克隆自肝素黄杆菌（Flavobacteriumheparinum）的肝素酶I（Heparinase I，EC4.2.2.7）广泛应用于低相对分子质量肝素（LMWH，low molecular weight heparin）制备研究。然而，该酶在大肠杆菌表达体系中易形成包涵体，限制了其大量应用。将可溶性配体SUMO（small ubiquitin?鄄like modifier，小泛素类似修饰蛋白质）与C端带有6×His标签的肝素酶基因片段N?鄄端融合表达，菌体总蛋白质和可溶性蛋白质SDS?鄄PAGE电泳表明，N端融合SUMO的肝素酶I可溶性表达比率显著提高；通过镍?鄄亲和柱层析得到均一纯化的融合肝素酶I，融合酶酶学性质表明该融合酶可直接应用于肝素降解而无需切除SUMO标签，为肝素酶I的广泛应用提供了良好的技术基础。