牛干扰素γ蛋白在Vero细胞中的表达及其抗病毒活性 |
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引用本文: | 宋佰芬,冯振月,孙虎男,马金柱,曹宏伟,崔玉东.牛干扰素γ蛋白在Vero细胞中的表达及其抗病毒活性[J].粉末涂料与涂装,2013,26(8):1134-1136. |
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作者姓名: | 宋佰芬 冯振月 孙虎男 马金柱 曹宏伟 崔玉东 |
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作者单位: | 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,黑龙江大庆,163319 |
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基金项目: | 黑龙江省科技厅青年基金资助项目,国家自然基金青年科学基金资助项目 |
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摘 要: | 目的在Vero细胞中表达牛干扰素γ基因,并对其抗病毒活性进行鉴定。方法将牛干扰素γ全基因克隆至pcDNA3.1(+)载体,构建重组表达质粒,经PCR及双酶切鉴定,将鉴定正确的阳性质粒通过脂质体法转染Vero细胞,分别采用间接免疫荧光和Western blot法检测细胞转染效率和干扰素γ蛋白的表达,采用细胞病变抑制试验检测其抗病毒活性。结果间接免疫荧光显示绿色荧光,表明牛干扰素γ蛋白在Vero细胞中得到表达,转染效率约为50%;Western blot检测可见相对分子质量约为22 000的目的条带,进一步验证了该蛋白的表达;细胞病变抑制试验显示细胞病变明显减少,表明表达的干扰素γ蛋白具有明显的抗病毒活性。结论成功在Vero细胞中表达了牛干扰素γ蛋白,其具有明显的抗病毒作用。
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关 键 词: | 干扰素γ 重组 Vero细胞 表达 抗病毒活性 |
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