| 花生过敏原蛋白Ara h 6基因克隆和原核表达 |
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| 引用本文： | 詹少德,邱昌将,朱 盼,吴志华,陈红兵. 花生过敏原蛋白Ara h 6基因克隆和原核表达[J]. 食品科学, 2016, 37(3): 125-130. DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201603024 |
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| 作者姓名： | 詹少德 邱昌将 朱 盼 吴志华 陈红兵 |
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| 作者单位： | 1.南昌大学 食品科学与技术国家重点实验室，中德联合研究院，江西 南昌 330047；2.浙江纺织服装职业技术学院，浙江 宁波 315200；3.广东省疾病预防控制中心，广东 广州 510300 |
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| 摘 要： | 本实验首先从花生中提取总RNA，利用反转录聚合酶链式反应技术克隆了花生过敏原蛋白Ara h 6全cDNA，并以此为模板扩增出Ara h 6目的基因。将目的基因与pMD19-T Simple质粒进行重组后转入BL21（DE3）宿主表达菌中，异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导产物表达，并利用镍离子亲和层析纯化表达产物。DNA测序结果显示Ara h 6基因片段全长为438 bp，编码145 个氨基酸，与已知该蛋白DNA序列97%相同；十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示表达产物分子质量为24 kD，与融合组氨酸标签的重组Ara h 6蛋白理论分子质量相符；质谱鉴定结果表明重组蛋白的一级结构与天然Ara h 6匹配度为100%；Western blotting结果显示融合蛋白能够为抗Ara h 6多克隆抗体所识别，具有免疫原性。
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| 关 键 词： | 花生 过敏原 Ara h 6 基因克隆表达 质谱鉴定 |
Gene Cloning and Prokaryotic Expression of Peanut Allergen Ara h 6 |
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| ZHAN Shaode,QIU Changjiang,ZHU Pan,WU Zhihua,CHEN Hongbing. Gene Cloning and Prokaryotic Expression of Peanut Allergen Ara h 6[J]. Food Science, 2016, 37(3): 125-130. DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201603024 |
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| Authors: | ZHAN Shaode QIU Changjiang ZHU Pan WU Zhihua CHEN Hongbing |
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| Affiliation: | 1. State Key Laboratory of Food Science and Technology, Sino-German Joint Research Institute, Nanchang University, Nanchang 330047, China; 2. Zhejiang Fashion Institute of Technology, Ningbo 315200, China;3. Center for Disease Control and Prevention of Guangdong Province, Guangzhou 510300, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | peanut allergen Ara h 6 recombinant expression mass spectrometry |
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