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烯酰还原酶基因的替换对裂殖壶菌合成二十碳五烯酸的影响
引用本文:杨瑞雄,郑鑫,陆涛,赵誉泽,杨庆华,卢英华,何宁,凌雪萍.烯酰还原酶基因的替换对裂殖壶菌合成二十碳五烯酸的影响[J].化工学报,2021,72(7):3768-3779.
作者姓名:杨瑞雄  郑鑫  陆涛  赵誉泽  杨庆华  卢英华  何宁  凌雪萍
作者单位:厦门大学化学化工学院,福建厦门361005;厦门大学化学化工学院,福建厦门361005;福建省海洋生物资源开发利用协同创新中心,福建厦门361005;福建省化学生物学重点实验室(厦门大学),福建厦门361005;厦门大学化学化工学院,福建厦门361005;福建省海洋生物资源开发利用协同创新中心,福建厦门361005
基金项目:国家自然科学基金重点项目(21736009);国家自然科学基金面上项目(31871779)
摘    要:二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)因具有调节血脂、降低纤维蛋白、预防心血管疾病以及抗炎抗过敏的生理功能,被广泛应用于食品、医疗、化妆品以及饲料添加等领域。目前,EPA的需求日益增加,但是富含多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs)的鱼油等自然资源逐渐匮乏,利用改造的微生物菌种发酵生产EPA的方式成为主要趋势。本研究利用同源重组技术将Shewanella sp. SCRC2738的烯酰还原酶基因(enoyl-reductase,sh-ER)分别敲入Schizochytrium limacinum SR21的ORFB-ERORFC-ER基因中,调控多不饱和脂肪酸合成的偏好性以提高EPA的产量。研究表明,sh-ER替换ORFB-ER基因的重组菌株(B-sh-ER)中EPA含量提高了85.7%,聚酮合酶(polyketide synthases,PKS)途径相关基因转录水平明显上调。而sh-ER替换ORFC-ER基因的重组菌株(C-sh-ER中PUFAs合成基本不变。在5 L发酵罐中放大培养后,B-sh-ER重组菌株总油脂提高28.7%,达到73.2 g/L;EPA产量提高71.6%,达到732.4 mg/L。本研究为促进裂殖壶菌PUFAs高产提供了新的策略,同时也为调控裂殖壶菌合成EPA提供了新的视角。

关 键 词:裂殖壶菌  希瓦氏菌  二十碳五烯酸  烯酰还原酶  分子生物学  发酵  代谢
收稿时间:2020-12-15

Effects of substitution of ER domains on the synthesis of eicosapentaenoic acid in Schizochytrium limacinum SR21
YANG Ruixiong,ZHENG Xin,LU Tao,ZHAO Yuze,YANG Qinghua,LU Yinghua,HE Ning,LING Xueping.Effects of substitution of ER domains on the synthesis of eicosapentaenoic acid in Schizochytrium limacinum SR21[J].Journal of Chemical Industry and Engineering(China),2021,72(7):3768-3779.
Authors:YANG Ruixiong  ZHENG Xin  LU Tao  ZHAO Yuze  YANG Qinghua  LU Yinghua  HE Ning  LING Xueping
Affiliation:1.College of Chemistry and Chemical Engineering, Xiamen University, Xiamen 361005, Fujian, China;2.Fujian Collaborative Innovation Center for Exploitation and Utilization of Marine Biological Resources, Xiamen 361005, Fujian, China;3.The Key Laboratory for Chemical Biology of Fujian Province (Xiamen University), Xiamen 361005, Fujian, China
Abstract:
Keywords:Schizochytrium limacinum  Shewanella  EPA  enoyl-reductase  molecular biology  fermentation  metabolism  
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