| 摘 要： | 目的 建立一种急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)FMS样酪氨酸激酶3(FMS-like tyrosine kinase-3,FLT3)-激酶结构域突变(tyrosine kinase domain,TKD)的高灵敏度检测方法，并将该方法应用于AML微小残留病灶(minimal residual disease,MRD)的监测。方法 构建FLT3野生型质粒和FLT3-D835Y突变型质粒，按一定比例混合后制备FLT3-D835Y突变率为50%、1%、0.1%和0%的质粒标准品，以其为检测对象，联合限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)识别法和一代测序法建立新的FLT3-TKD检测方法。用建立的方法检测含不同FLT3-D835Y突变率的质粒DNA标准品和血液样本DNA标准品，以验证方法的灵敏度；用建立的方法检测AML患者治疗前后的基因组DNA样本，以监测MRD。结果 构建的FLT3野生型质粒和FLT3-D835Y突变型质粒经测序证明构建正确。在纯化的质粒DNA和收集的血液样本DN...
|
