| 表达SARS-CoV-2 Delta突变株S蛋白受体结合域和N蛋白的重组腺病毒的构建及鉴定 |
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| 作者姓名： | 宋泽鑫 周艳 林晓晨 赵永美 施鹏 王学付 张朝武 李鸿钧 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南省重大传染病疫苗研发重点实验室 |
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| 基金项目： | 云南省应用基础研究计划（202201AT070236）； |
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| 摘 要： | 目的 构建表达严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARS-CoV-2)Delta突变株S蛋白受体结合域（receptor binding domain,RBD）和N蛋白的重组腺病毒，并进行鉴定。方法 将SARSCoV-2 RBD和N基因片段分别克隆至pcDNA3.0BA载体上，构建重组质粒pcDNA3.0BA-RBD-N,PCR扩增RBD-CMVN片段，连接至穿梭载体pShuttle-CMV上，将穿梭质粒pShuttle-RBD-N与pAdeasy-1进行同源重组，获得重组质粒pAdeasy-1-RBD-N，转染HEK293细胞进行重组腺病毒Ad-RBD-N包装，RT-PCR法检测重组腺病毒中RBD和N基因在HEK293细胞中的转录，Western blot和免疫荧光法检测重组腺病毒中RBD和N蛋白的表达。将Ad-RBD-N通过肌肉注射免疫12只雌性BALB/c小鼠，免疫剂量为5×109copies/只，免疫后14 d经尾静脉采血，ELISA法检测血清抗体效价。结果 重组腺病毒RBD和N基因能在H...
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| 关 键 词： | 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 S蛋白 受体结合域 N蛋白 腺病毒 |
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