| 重组人生长激素-Fc免疫融合蛋白多聚体含量尺寸排阻高效液相色谱检测方法的优化及验证 |
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| 引用本文： | 马陌,孙瑞欣,王江林,刘冰莹,刘景会.重组人生长激素-Fc免疫融合蛋白多聚体含量尺寸排阻高效液相色谱检测方法的优化及验证[J].粉末涂料与涂装,2023(10):1235-1241. |
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| 作者姓名： | 马陌 孙瑞欣 王江林 刘冰莹 刘景会 |
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| 作者单位： | 长春生物制品研究所有限责任公司重组蛋白研究室 |
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| 基金项目： | 吉林省重点科技攻关项目（20160204034YY）； |
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| 摘 要： | 目的 优化重组人生长激素(recombinant human growth hormone,rhGH)-Fc免疫融合蛋白多聚体含量尺寸排阻高效液相色谱(size exclusion chromatography-high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)检测方法 ,并对优化的方法 进行验证。方法 利用SEC-HPLC法对rhGH-Fc免疫融合蛋白中多聚体含量进行检测,优化检测条件(盐浓度、流动相pH、流速、柱温及色谱柱型号),观察目的 蛋白与聚合体分离的效果。对方法 的系统适应性、专属性、线性与范围、精密性、准确性及定量限进行验证。结果 优化后的方法 为采用TSK-gel G2000SWxl色谱柱(5μm,7.8 mm×300 mm)进行测定,流动相50 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 6.80),检测波长280 nm,进样量100μL,流速0.6 mL/min,柱温45℃。rhGH-Fc免疫融合蛋白与聚合物分离度、理论塔板数、拖尾因子均能满足要求;rhGH-Fc免疫融合蛋白样品与对照品出峰时间一致,GH国家标...
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| 关 键 词： | 尺寸排阻高效液相色谱 重组人生长激素 免疫融合蛋白 多聚体 |
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