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| 沙门菌PCR-ELISA检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 韩来辉,董少晨,王佳凤,李井涛.沙门菌PCR-ELISA检测方法的建立[J].粉末涂料与涂装,2015,28(5). |
| 作者姓名： | 韩来辉 董少晨 王佳凤 李井涛 |
| 作者单位： | 1. 吉林省食品检验所,吉林长春,130021 2. 吉林省突发公共卫生事件处置服务中心,吉林长春,130021 3. 长春生物制品研究所有限责任公司,吉林长春,130062 |
| 摘 要： | 目的建立沙门菌PCR-ELISA检测方法,并进行验证。方法根据沙门菌inv A基因设计PCR-ELISA引物及探针,进行PCR扩增、核酸杂交及ELISA检测,对变性反应条件、杂交探针浓度、杂交时间和温度及显色时间进行优化,确定阴性、阳性判定的阈值,并进行敏感性、特异性及重复性验证。用建立的PCR-ELISA方法检测人工染菌的22批中药丸剂及27批液体乳中的沙门菌,并与PCR及GB4789方法进行比较。结果 150 mmol/L Na OH变性液可使核酸变性最彻底,50 pmol/ml地高辛标记探针为最适浓度,50℃60 min为最佳杂交时间和温度,最佳显色时间为50 min;阴性、阳性的阈值为0.265。该方法最低检测限为0.5 pg/μl,灵敏度高;能针对性地扩增沙门菌的特异性片段,检测特异性强;检测结果的批内、批间变异系数均小于10%,重复性较好。人工染菌的22批中药丸剂和27批液体乳的PCR-ELISA方法检测阳性率明显高于PCR法,与GB4789方法检测阳性率基本一致。结论优化后的PCRELISA方法特异性强,灵敏度高,重复性好,可快速检测食品、药品中的沙门菌。 |
| 关 键 词： | 沙门菌 聚合酶链反应 酶联免疫吸附试验 |
Development of PCR-ELISA for salmonella |
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| HAN Lai-hui,DONG Shao-chen,WANG Jia-feng,LI Jing-tao.Development of PCR-ELISA for salmonella[J].Chinese Journal of Biologicals,2015,28(5). | |
| Authors: | HAN Lai-hui DONG Shao-chen WANG Jia-feng LI Jing-tao |
| Abstract: | |
| Keywords: | Salmonella Polymerase chain reaction (PCR) Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) |
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