| 生物反应器微载体规模化培养轮状病毒重配株LH9 |
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| 引用本文： | 孙振鹏,孙燕,范秀娟,王名强,包红,李薇.生物反应器微载体规模化培养轮状病毒重配株LH9[J].粉末涂料与涂装,2015,28(5). |
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| 作者姓名： | 孙振鹏 孙燕 范秀娟 王名强 包红 李薇 |
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| 作者单位： | 兰州生物制品研究所有限责任公司第六研究室,甘肃兰州,730046 |
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| 摘 要： | 目的利用Vero细胞生物反应器微载体培养技术规模化培养轮状病毒重配株LH9(G4型)。方法用3 L生物反应器,以4 g/L载体浓度培养Vero细胞,待细胞浓度达1.8×106个/ml时,分别用含2、1、0.75、0μg/ml胰酶的DMEM培养液,35℃连续培养21 d,观察细胞生长状态。分别按0.5、0.1、0.05、0.01 MOI接种轮状病毒重配株LH9(G4),培养过程中每日取样,检测病毒滴度以及葡萄糖、乳酸含量。根据培养过程中葡萄糖、乳酸含量的变化,确定病毒培养过程中的收获时间,优化培养工艺。结果在反应器中用含不同浓度胰酶的DMEM培养Vero细胞,细胞形态良好,与不含胰酶的DMEM培养液培养的细胞无明显差异;按0.05 MOI接种后的病毒收获液滴度较高,可达7.0 lg CCID50/ml,且持续时间较长;通过对病毒培养液中葡萄糖、乳酸含量的监测,调整了培养过程中的收获时间,收获次数增加至4次,可收获病毒液4个工作体积,病毒高峰滴度可达8.5 lg CCID50/ml。结论采用生物反应器微载体系统培养轮状病毒重配株LH9(G4),可显著提高病毒滴度,通过对培养过程的优化,增加了病毒收获量,为进一步规模化生产轮状病毒疫苗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 生物反应器 微载体 轮状病毒 |
Large-scale culture of rotavirus reassortant strain LH9 by using microcarriers in bioreactor |
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| SUN Zhen-peng,SUN Yan,FAN Xiu-juan,WANG Ming-qiang,BAO Hong,LI Wei.Large-scale culture of rotavirus reassortant strain LH9 by using microcarriers in bioreactor[J].Chinese Journal of Biologicals,2015,28(5). |
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| Authors: | SUN Zhen-peng SUN Yan FAN Xiu-juan WANG Ming-qiang BAO Hong LI Wei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bioreactor Microcarriers Rotavirus |
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