PEG-CaCl_2介导苏云金杆菌CryⅠA(b)基因转化哈茨木霉 |
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引用本文: | 高兴喜,杨谦.PEG-CaCl_2介导苏云金杆菌CryⅠA(b)基因转化哈茨木霉[J].哈尔滨工业大学学报,2005(10). |
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作者姓名: | 高兴喜 杨谦 |
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作者单位: | 哈尔滨工业大学生命科学与工程系 黑龙江哈尔滨150001
(高兴喜),哈尔滨工业大学生命科学与工程系 黑龙江哈尔滨150001(杨谦) |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划资助项目(2003AA241140) |
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摘 要: | 为构建兼具杀虫防病双重功效的工程菌株,通过PEG-CaC l2介导的原生质体法将来自苏云金芽孢杆菌的CryⅠA(b)基因导入生防真菌哈茨木霉中.转化频率约为2~3个转化子/μg质粒DNA.Southern b lot和RT-PCR检测结果表明,CryⅠA(b)基因已经整合到哈茨木霉基因组DNA中,并且在转录水平上得到了表达.各转化子都能够稳定遗传.对转化子的抑菌活性和杀虫活性检测结果表明,转化子不但保持了野生菌株的抑菌活性,而且表现出了一定的杀虫效果.转化子Tp1和Tp2对玉米螟幼虫的矫正死亡率分别为75.00%和72.73%.杀虫防病哈茨木霉工程菌株的构建为研究和开发新型微生物农药探索了新的途径.
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关 键 词: | 哈茨木霉 苏云金杆菌 CryⅠA(b)基因 遗传转化 |
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