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| 相分离联合层析去除类人胶原蛋白中的内毒素 | |
| 作者单位： | ;1.西北大学化工学院;2.陕西省生物材料与发酵工程研究中心 |
| 摘 要： | 研究类人胶原蛋白(HLC)中内毒素的去除方法,为规模化制备医用生物材料提供参考。采用Triton X-114双水相分离法作为内毒素去除工艺的第1步,亲和层析法作为工艺的第2步,二者偶联操作从类人胶原蛋白中除去内毒素,并对除去内毒素后的HLC进行了理化性能检测。结果表明:采用Triton X-114双水相分离法,在蛋白质量浓度2.06 mg/m L,作用温度44.71℃,作用时间3 h,溶液pH值为7时双水相分离系数K=9.58,蛋白中内毒素含量由10 000—25 000 EU/mg下降为1.5—2.0 EU/mg,蛋白回收率为95.6%;偶联了多聚赖氨酸亲和配基的亲和层析后,HLC中内毒素含量由1.5—2.0 EU/mg降至0.025—0.25 EU/mg,蛋白回收率可达81.9%;2步操作均不会使蛋白发生相对分子质量及化学结构的改变。此工艺操作简便,可显著降低生产成本。 |
| 关 键 词： | 类人胶原蛋白 内毒素 Triton X-114双水相分离 亲和层析 |
Endotoxin removal from human-like collagen using Triton X-114 two-phase extraction and affinity chromatography resin |
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