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多酶级联系统制备蒜糖醇的细胞工厂构建及工艺优化
引用本文:赵婧邑,郭燕,冯婷婷,陈静,孙钦菊,刘继栋. 多酶级联系统制备蒜糖醇的细胞工厂构建及工艺优化[J]. 食品科学技术学报, 2022, 40(3): 88-97
作者姓名:赵婧邑  郭燕  冯婷婷  陈静  孙钦菊  刘继栋
作者单位:广西大学 轻工与食品工程学院, 广西 南宁 530004;广西南亚热带农业科学研究所, 广西 龙州 532415;广西农业职业技术大学 食品工程系, 广西 南宁 530007
基金项目:广西壮族自治区自然科学基金项目(2018GXNSFAA050126; 2020GXNSFAA297104); 广西壮族自治区崇左市科技项目(FA2020001)。
摘    要:蒜糖醇是一种在食品、医药等领域具有较大应用前景的新型功能性甜味剂。为实现蒜糖醇的绿色生物合成,基于稀有糖转化策略通过共表达葡萄糖异构酶、D-阿洛酮糖3-差向异构酶及核糖醇脱氢酶,在大肠杆菌体内建立了利用廉价底物D-葡萄糖生产蒜糖醇的多酶级联系统;并通过偶联甲酸脱氢酶构建辅因子循环系统,提高胞内还原型辅酶Ⅰ的再生效率。为平衡多酶级联系统中的个体表达差异,以全细胞催化活性为指标,对细胞工厂的发酵条件和催化条件进行了优化。结果表明:重组菌在20℃、1.00mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷的发酵条件下,诱导24h可得到较佳的蛋白质表达量;在40℃、50mmol/L Tris-HCl (pH值8.0)及5.0g/L甲酸钠的催化条件下,全细胞可在15h内转化25.00g/L的D-葡萄糖生成19.33g/L蒜糖醇。通过表达系统的优化进一步降低了底物和中间产物的残留量,蒜糖醇的产量提高至21.12g/L。研究旨在为全细胞生物转化法实现蒜糖醇的规模化合成提供理论依据,探索以预处理甘蔗糖蜜为底物生产蒜糖醇的可行性,希望对延长糖产业链,提高糖产品附加值起到积极作用。

关 键 词:蒜糖醇   全细胞催化   多酶级联系统   细胞工厂   甘蔗糖蜜
收稿时间:2021-11-01

Construction and Process Optimization of Cell Factory for Allitol Synthesis with Multienzymatic Cascade System
ZHAO Jingyi,GUO Yan,FENG Tingting,CHEN Jing,SUN Qinju,LIU Jidong. Construction and Process Optimization of Cell Factory for Allitol Synthesis with Multienzymatic Cascade System[J]. Journal of Food Science and Technology, 2022, 40(3): 88-97
Authors:ZHAO Jingyi  GUO Yan  FENG Tingting  CHEN Jing  SUN Qinju  LIU Jidong
Affiliation:College of Light Industry and Food Engeering, Guangxi University, Nanning 530004, China;South Asia Subtropical Agricultural Scientific Research Institute of Guangxi, Longzhou 532415, China;Department of Food Engineering, Guangxi Agricultural Vocational University, Nanning 530007, China
Abstract:
Keywords:allitol   whole-cell catalysis   multienzymatic cascade system   cell factory   sugarcane molasses
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