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日本曲霉酸性蛋白酶的分泌表达、性质及其在猪肉嫩化中的应用
引用本文:薛意斌,李雪,李延啸,江正强,闫巧娟. 日本曲霉酸性蛋白酶的分泌表达、性质及其在猪肉嫩化中的应用[J]. 食品科学技术学报, 2022, 40(5): 82-92, 109
作者姓名:薛意斌  李雪  李延啸  江正强  闫巧娟
作者单位:中国农业大学 食品科学与营养工程学院/中国轻工业食品生物工程重点实验室, 北京 100083;中国农业大学 工学院, 北京 100083
基金项目:“十三五”国家重点研发计划子课题(2021YFC2100302)。
摘    要:为研究日本曲霉酸性蛋白酶的分泌表达、性质及其在猪肉嫩化中的应用。将日本曲霉来源的酸性蛋白酶基因(AjproA1)在毕赤酵母中高效表达,经5L发酵罐高密度发酵后测得该酸性蛋白酶酶活力为669.6U·mL-1,蛋白质量浓度为6.64mg·mL-1。氨基酸多重序列比对结果表明:该酸性蛋白酶属于天冬氨酸蛋白酶A1家族,与海枣曲霉来源的酸性蛋白酶同源性最高(73%),是一个新型的酸性蛋白酶。采用强阴离子交换层析柱对该酸性蛋白酶进行纯化得到电泳级纯酶,纯化后分析测得该重组酸性蛋白酶(AjproA1)的最适催化条件为pH值3.0,反应温度为45℃,在pH值为3.0~6.0及温度为40℃以下具有良好的稳定性。该酸性蛋白酶对不同蛋白质水解的分析结果表明,该酶底物水解特异性广泛,对酪蛋白组分中的κ-酪蛋白表现出最高水解活力。利用该酸性蛋白酶对猪肉进行处理,发现该酶能够有效降低猪肉剪切力,起到嫩化效果。研究结果旨在为新型酸性蛋白酶的开发及其在肉类嫩化中的应用提供理论参考。

关 键 词:日本曲霉   酸性蛋白酶   毕赤酵母   分泌表达   猪肉嫩化
收稿时间:2021-12-27

Secretory Expression and Properties of Acid Protease from Aspergillus japonicus and Its Application in Pork Tenderization
XUE Yibin,LI Xue,LI Yanxiao,JIANG Zhengqiang,YAN Qiaojuan. Secretory Expression and Properties of Acid Protease from Aspergillus japonicus and Its Application in Pork Tenderization[J]. Journal of Food Science and Technology, 2022, 40(5): 82-92, 109
Authors:XUE Yibin  LI Xue  LI Yanxiao  JIANG Zhengqiang  YAN Qiaojuan
Affiliation:College of Food Science and Nutritional Engineering/Key Laboratory of Food Bioengineering China National Light Industry, China Agricultural University, Beijing 100083, China;College of Engineering, China Agricultural University, Beijing 100083, China
Abstract:
Keywords:Aspergillus japonicus   acid protease   Pichia pastoris   secretory expression   pork tenderization
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