| Lys490饱和突变提高海藻糖合酶转化率的研究 |
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| 引用本文： | 吕鑫,王腾飞,汪俊卿,刘洪玲,王瑞明.Lys490饱和突变提高海藻糖合酶转化率的研究[J].食品与发酵工业,2018(1):60-65. |
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| 作者姓名： | 吕鑫 王腾飞 汪俊卿 刘洪玲 王瑞明 |
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| 作者单位： | 齐鲁工业大学生物工程学院;天津科技大学生物工程学院; |
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| 摘 要： | 分析预测海藻糖合酶的空间结构,并进行分子对接和序列比对,选择Lys490位点进行定点饱和突变。利用全质粒PCR方法构建饱和突变体库,并利用高效液相色谱法筛选优势突变。经过筛选获得优势突变体K490L、K490I,对比分析表明,突变体K490L、K490I的转化率较原始酶分别提高了18%和15%。突变体酶学性质分析表明,K490L、K490I的最适反应温度及最适pH与原始酶保持一致,皆为25℃和pH 8.0,但两种突变酶的耐热性及耐酸性较原始酶有明显增强。在pH 7.0环境下,突变体K490L、K490I放置60 min后,剩余酶活力均达80%以上,而原始酶低于68%。
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| 关 键 词： | 海藻糖合酶 定点饱和突变 转化率 分子改造 |
Enhance the conversion rate of trehalose synthase by Lys490 site-saturation mutation |
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