| 摘 要： | 利用宏基因组文库方法，通过功能筛选法从文库中筛选到一个新型β-葡萄糖苷酶基因bgl2238（GenBank：KU320675.1），对新基因进行生物信息学分析和原核表达，并研究其酶学性质。结果表明，该基因全长2238bp，可编码745个氨基酸，通过氨基酸序列分析，预测bgl2238蛋白分子质量为80.67kDa，pI值为4.95，是一种结构较稳定、疏水性高且无信号肽序列的酸性蛋白质；经同源性分析，发现其与来源于Bacteroides thetaiotaomicron的β-葡萄糖苷酶具有58%的相似性，属于GH3超家族和GH3C超家族酶。将重组质粒pET-32a（＋）-bgl2238转化入Escherichia coli BL2l（DE3）细胞进行异源表达，酶学性质测定结果显示，以对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷（p-nitrophenyl-β-D-glucopyranoside，pNPG）为底物，β-葡萄糖苷酶bgl2238最适反应pH值和温度分别为6.10、44℃，此时该酶最大比活力达到29.1U/mg；且在4～50℃范围内，热处理β-葡萄糖苷酶bgl22384h后仍保留70%以上的酶活力，热稳定性较好；其动力学参数Vmax为576μmoL/（L·min），Km为0.296mmol/L；不同浓度的K＋、Na＋、Fe2＋、Mg2＋、Mn2＋、Ca2＋、Co2＋和Ni2＋对酶活力均有较大促进作用，其中Fe2＋对bgl2238酶活力的促进作用最大，10mmol/LFe2＋使相对酶活力高达260%，而重金属离子Ag＋、Hg2＋及Cu2＋对酶活力有抑制作用。bgl2238具有良好的酶学性质，可以尝试应用于工业上纤维素降解的生产。
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