| 极端嗜热酸性α-淀粉酶PFA在枯草芽孢杆菌中的高效分泌表达 |
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| 引用本文： | 袁林,曾静,郭建军,郭浩,杨罡,陈俊.极端嗜热酸性α-淀粉酶PFA在枯草芽孢杆菌中的高效分泌表达[J].食品科学,2018,39(18):100-108. |
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| 作者姓名： | 袁林 曾静 郭建军 郭浩 杨罡 陈俊 |
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| 作者单位： | （江西省科学院微生物研究所，江西?南昌 330096） |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金青年科学基金项目（31501422）；江西省青年科学基金项目（20171BAB214003）；
江西省重点研发计划项目（20171BBF60006）；江西省科学院资助项目（2017-YCXY-13） |
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| 摘 要： | 为探索极端嗜热酸性α-淀粉酶PFA在枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis WB600）中的高效分泌表达条件，对来源于枯草芽孢杆菌的9?种Sec分泌途径信号肽进行筛选，结果显示信号肽YfkN的引导分泌效率最高。在此基础上，为进一步优化PFA的分泌表达，对信号肽YfkN的Ile3和Gln4进行饱和突变，并比较不同突变体的引导分泌效率。结果表明突变体I3G/Q4R的引导分泌效率最高，重组枯草芽孢杆菌的胞外α-淀粉酶活力高达715?U/mL。重组α-淀粉酶PFA的最适反应pH值为5.0，最适反应温度为100?℃，于100?℃的半衰期长达13?h，并且不依赖于Ca2＋。结果表明，采用信号肽I3G/Q4R，极端嗜热酸性α-淀粉酶PFA能够在枯草芽孢杆菌中高效分泌表达，这有利于其在淀粉液化工艺中的应用。
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| 关 键 词： | 极端嗜热酸性α-淀粉酶 枯草芽孢杆菌 信号肽 分泌表达 饱和突变 |
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