| 嗜酸芽孢杆菌普鲁兰酶在大肠杆菌中的表达及发酵优化 |
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| 引用本文： | 杨向会,陈晟,吴敬. 嗜酸芽孢杆菌普鲁兰酶在大肠杆菌中的表达及发酵优化[J]. 食品与机械, 2018, 34(5): 20-26 |
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| 作者姓名： | 杨向会 陈晟 吴敬 |
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| 作者单位： | 江南大学食品科学与技术国家重点实验室;江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室;江南大学教育部食品安全国际合作联合实验室 |
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| 基金项目： | 国家杰出青年基金(编号：31425020)；江苏省重点研发计划项目(编号：BE2017319)；中央高校基本科研业务费专项资金（编号：JUSRP51706A） |
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| 摘 要： | 为了在3L发酵罐水平上提高重组菌E.coli BL 21(DE3)/pET20b(+)-BapulA的普鲁兰酶的表达量和胞外分泌,将嗜酸芽孢杆菌普鲁兰酶(Bacillus acidopullulyticus)在大肠杆菌中进行重组表达,并在3L发酵罐水平上对重组菌进行发酵优化,考察了发酵条件对重组酶表达的影响。重组菌发酵的最佳条件为:发酵前期菌体生长温度和pH分别为30℃和7.0,当菌体浓度OD_(600)达到50时,发酵温度降低至25℃,此时调节pH为6.2,同时开始流加乳糖[0.4g/(L·h)]进行诱导;在发酵过程中,当菌体浓度OD_(600)依次达到15,45,75时,分别加入浓度为1.5g/L的甘氨酸,当菌体OD600为105时,再加入浓度为3g/L的甘氨酸。发酵结束后普鲁兰酶的胞外酶活达659.0U/mL,最高总酶活达1 910.1U/mL,与摇瓶的初始总酶活(41.1U/mL)和胞外酶活(6.5U/mL)相比,分别提高了45.4倍和100倍。
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| 关 键 词： | 普鲁兰酶；重组表达；发酵优化；pH；甘氨酸 |
| 收稿时间： | 2018-01-29 |
Expression of Bacillus acidopullulyticus pullulanase in Escherichia coli and its optimization of fermentation |
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| YANGXianghui,CHENSheng,WUJing. Expression of Bacillus acidopullulyticus pullulanase in Escherichia coli and its optimization of fermentation[J]. Food and Machinery, 2018, 34(5): 20-26 |
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| Authors: | YANGXianghui CHENSheng WUJing |
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| Affiliation: | State Key Laboratory of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China; School of Biotechnology, Key Laboratory of Industrial Biotechnology, by the Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China; Joint Laboratory for International Cooperation in Food Safety by the Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi, Jiangsu 214122, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pullulanase recombinant expression fermentation optimization pH glycine |
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