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解旋酶恒温基因扩增方法快速检测酸乳中醋化醋杆菌
引用本文:朱华东,刘东,贾昭斌,刘昊,刘帅,周巍. 解旋酶恒温基因扩增方法快速检测酸乳中醋化醋杆菌[J]. 食品安全质量检测学报, 2018, 9(14): 3720-3724
作者姓名:朱华东  刘东  贾昭斌  刘昊  刘帅  周巍
作者单位:河北省食品检验研究院河北省食品安全重点实验室
基金项目:国家重点研发计划(2017YFC1601400)
摘    要:目的建立解旋酶恒温基因扩增方法(helicase-dependent isothermal DNA amplification,HDA)快速检测酸乳中醋化醋杆菌的分析方法。方法以醋化醋杆菌的16S-23S rRNA ITS序列为目的基因,设计一对特异性引物,优化反应条件UvrD helicase、T4 gp32的浓度,通过解旋酶恒温基因扩增方法直接检测酸乳中醋化醋杆菌,扩增产物通过电泳进行检测。结果 HDA法检测酸乳中醋化醋杆菌的特异性强,实验涉及的其他菌株均未发生扩增,只有醋化醋杆菌得到与设计序列长度一致的197 bp基因片段,方法检出限为3.6×10~1 CFU/g,实验条件优化后T4 gp32、UvrD helicase的终含量分别为4.0、0.15μg。结论该方法灵敏度较高,时间较短,为酸乳中醋化醋杆菌的检测提供了新的思路,同时也为其他食品污染菌的快速检测提供了借鉴意义。

关 键 词:解旋酶恒温基因扩增方法   酸乳   醋化醋杆菌   检测
收稿时间:2018-06-29
修稿时间:2018-07-16

Determination of Acetobacteracetis in yogurt by helicase-dependent isothermal DNA amplification
ZHU Hua-dong,LIU Dong,JIA Zhao-bin,LIU Hao,LIU Shuai and ZHOU Wei. Determination of Acetobacteracetis in yogurt by helicase-dependent isothermal DNA amplification[J]. Journal of Food Safety & Quality, 2018, 9(14): 3720-3724
Authors:ZHU Hua-dong  LIU Dong  JIA Zhao-bin  LIU Hao  LIU Shuai  ZHOU Wei
Affiliation:Hebei Food Inspection and Research Institute,Hebei Food Safety Key Laboratory,Hebei Food Inspection and Research Institute,Hebei Food Safety Key Laboratory,Hebei Food Inspection and Research Institute,Hebei Food Safety Key Laboratory,Hebei Food Inspection and Research Institute,Hebei Food Safety Key Laboratory,Hebei Food Inspection and Research Institute,Hebei Food Safety Key Laboratory,Hebei Food Inspection and Research Institute,Hebei Food Safety Key Laboratory
Abstract:
Keywords:helicase-dependent isothermal DNA amplification   yugort   Acetobacteracetis   detection
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