LC-MS/MS法同时测定人全血中四种免疫抑制剂类药物浓度

目的: 建立LC-MS /MS法同时测定人全血中环孢素A、依维莫司、他克莫司和西罗莫司的浓度。方法: 人全血样品用乙腈沉淀蛋白后，上清液用叔丁基甲醚提取后选用ZORBAX SB C₁₈(2.1 mm×100 mm, 3.5 μm)色谱柱，流动相采用甲醇10 mmol/L 乙酸铵溶液(均含0.1%甲酸)梯度洗脱，采用电喷雾离子化源，正离子方式，多反应监测(MRM)扫描方式进行监测，用于定量分析的离子反应分别为m/z 1 202.6→m/z 425.1（环孢素A）、m/z 975.8→m/z 908.6（依维莫司）、m/z 821.6→m/z 768.5（他克莫司）、m/z 931.8→m/z 864.2（西罗莫司）和m/z 366.2→m/z 132.0（内标吲达帕胺）。 结果: 全血中环孢素A的线性范围为10~2 000 ng/mL( r=0.996 2), 定量下限为 10 ng/mL，依维莫司、他克莫司和西罗莫司的线性范围为 0.50~100 ng/mL (r＞0.99)，定量下限为 0.50 ng/mL；四种药物的平均回收率 95.1%~110.6%；日内、日间RSD均小于15%；提取回收率在 78.6%~85.9%之间。结论: 该方法快速、灵敏、准确，专属性强，重复性好，适用于人全血中同时测定环孢素A、依维莫司、他克莫司和西罗莫司浓度。