| 毕赤酵母不同甲醇利用表型Mut~+和Mut~s表达FsGLUm基因的比较 |
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| 引用本文： | 杨玉霞,罗艳丽,张慧玲,汪艳,陈勇,裴建华.毕赤酵母不同甲醇利用表型Mut~+和Mut~s表达FsGLUm基因的比较[J].食品工业科技,2015(6):220-224,239. |
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| 作者姓名： | 杨玉霞 罗艳丽 张慧玲 汪艳 陈勇 裴建华 |
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| 作者单位： | 新疆农业大学新疆肉乳用草食动物营养与饲料重点实验室;新疆农业大学草业与环境科学学院 |
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| 基金项目： | 新疆维吾尔自治区科技支疆项目(201191138);新疆维吾尔自治区高技术研究发展项目(201211104);自治区重点产业紧缺人才专业大学生创新项目(JQRCP32010023) |
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| 摘 要： | 将来源于产琥珀酸丝状杆菌的β-葡聚糖酶基因根据毕赤酵母的偏好性进行密码子优化,通过全基因合成该优化基因(Fs GLUm)并构建重组表达载体p PIC9K-Fs GLUm。将p PIC9K-Fs GLUm分别用SalⅠ和BglⅡ酶切线性化后电击转化入毕赤酵母GS115染色体DNA中,经过表型筛选和抗性筛选获得不同甲醇利用表型Mut+和Muts阳性菌株。经刚果红平板检测,在摇瓶水平下,Mut+型菌株表达产物产生的水解透明圈明显大于Muts型菌株表达产物。在发酵罐水平下,Mut+型菌株各时间段表达产物酶活性明显高于Muts型菌株。Mut+型菌株表达的酶活性在甲醇诱导96h达到最大值,为6424U/m L,比活性为2607U/mg,菌体干重为123.6g/L。Muts型菌株表达的酶活性在诱导后108h达到最大值,为119U/m L,比活性为1867U/mg,菌体干重为113.5g/L。以上结果表明,Mut+型毕赤酵母更有利于产琥珀酸丝状杆菌β-葡聚糖酶基因的表达。
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| 关 键 词： | 产琥珀酸丝状杆菌 β-葡聚糖酶 毕赤酵母 甲醇利用表型 |
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