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共表达分子伴侣提高漆酶在毕赤酵母中的分泌
引用本文:王晨蕾,刘松,堵国成,陈坚. 共表达分子伴侣提高漆酶在毕赤酵母中的分泌[J]. 食品与生物技术学报, 2019, 38(11): 1-8
作者姓名:王晨蕾  刘松  堵国成  陈坚
作者单位:江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122; 江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122; 江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122; 江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122,江南大学 工业生物技术教育部重点实验室,江苏 无锡 214122; 江南大学 生物工程学院,江苏 无锡 214122
摘    要:通过共表达分子伴侣的策略提高漆酶在毕赤酵母中的产量。前期基于Pichia pastoris密码子偏好性,合成了来源于Cerrena sp. WR1的漆酶基因,克隆至pPIC9K,转化Pichia pastoris GS115,得到重组菌株PP-L。在PP-L中,分别过量表达蛋白质折叠(BIP、ERO1)、囊泡运输(SEC53、SEC1)、胁迫应激(HAC1、GCN4)相关的6种分子伴侣。结果显示,共表达这6种分子伴侣对分泌表达漆酶的菌株PP-L的正常生长没有影响;共表达BIP使重组菌胞外酶活提高359%,共表达ERO1胞外酶活反而降低22%;共表达其它4种分子伴侣对胞外酶活提高18%~53%。组合共表达BIP和HAC1的重组菌P1较PP-L胞外酶活提高了602%,酶活达到3 896 U/L。推测由于强化内质网中BIP水平进而提高了蛋白质折叠能力,从而提高其分泌效率。该研究结果将有助于发酵法生产漆酶的工业化。

关 键 词:漆酶;毕赤酵母;分子伴侣;共表达;分泌表达;蛋白质折叠

Improving the Secretory Expression of Laccase in Pichia pastoris by Co-Expressing Chaperones
WANG Chenlei,LIU Song,DU Guocheng and CHEN Jian. Improving the Secretory Expression of Laccase in Pichia pastoris by Co-Expressing Chaperones[J]. Journal of Food Science and Biotechnology, 2019, 38(11): 1-8
Authors:WANG Chenlei  LIU Song  DU Guocheng  CHEN Jian
Abstract:
Keywords:
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