来源于生孢噬纤维菌的新型β-葡萄糖苷酶SmBgl3A的性质研究 |
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作者姓名: | 费嵩禹 王梓懿 荆晓凤 杨帆 陈晓艺 李宪臻 |
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作者单位: | 大连工业大学 生物工程学院,辽宁 大连 116034 |
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摘 要: | 通过表达水平分析比较,从生孢噬纤维菌Sporocytophaga sp. CX11基因组中筛选出在菌株降解纤维二糖过程中起关键作用的β-葡萄糖苷酶基因SmBgl3A。该基因含有2 283 bp碱基对,编码760个氨基酸,其编码蛋白质与来源于Bacteroides ovatus的β-葡萄糖苷酶BoGH3B同源性为46.76 %。将该基因在大肠杆菌中进行异源表达,粗酶液经Ni-NTA亲和层析一步纯化得到电泳级纯度的酶蛋白SmBgl3A,重组蛋白质相对分子质量与理论值(81.2×104)一致。酶学性质表征结果表明,SmBgl3A最适温度和pH分别为35 ℃和6.5;pH在5.0~7.0、温度在40 ℃以下时,稳定性较好,同时有着较好的NaCl耐受性。SmBgl3A的最适底物为pNPG,以pNPG为底物时的比活力为14.74 U/mg;Km为10.88 mmol/L,kcat为46.72 s< sup > -1。SmBgl3A作为一种新型的、酶学性质优良的β-葡萄糖苷酶,进一步扩展了β-葡萄糖苷酶的种类,为该酶在纤维素降解、食品工业等领域的应用奠定基础。
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关 键 词: | β-葡萄糖苷酶;GH3家族;生孢噬纤维菌CX11;异源表达;酶学性质 |
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