马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种real-time PCR检测方法的建立与应用

本研究建立了一种特异性实时聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction,real-time PCR）检测方法，根据模式菌株马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种ZW3的16S rDNA序列和全基因组序列设计筛选特异性引物，采用SYBR Green I荧光染料建立real-time PCR方法，并对方法的特异性、灵敏度、重复性和混合体系等进行检测。结果表明，本研究所建立的方法特异性强、灵敏度高、重复性好，建立real-time PCR的标准曲线，其决定系数R2为0.965，具有良好的线性关系，且在马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种及混合体系中可以特异性检出。综上，本研究建立的real-time PCR法可以快速、准确地检测马乳酒样乳杆菌马乳酒样亚种，为马乳酒样乳杆菌的特异性定性定量检测提供了一种新的方法。