| 分子伴侣CsaA过表达及wprA蛋白酶的缺失对枯草芽孢杆菌分泌表达外源蛋白的影响 |
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| 引用本文： | 蒋红亮,张虹,赵辅昆,丁明.分子伴侣CsaA过表达及wprA蛋白酶的缺失对枯草芽孢杆菌分泌表达外源蛋白的影响[J].浙江理工大学学报,2011,28(2). |
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| 作者姓名： | 蒋红亮 张虹 赵辅昆 丁明 |
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| 作者单位： | 浙江理工大学蛋白质组学与分子酶学研究室,杭州,310018 |
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| 摘 要： | 在枯草芽孢杆菌B.subtilis168菌株,以及在其改造菌株B.subtilis168wprA和B.subtilis168/wprA::csaA中表达来自碱性芽孢杆菌C-125的碱性果胶酶和来自巨大芽孢杆菌的青霉素酰化酶.碱性果胶酶在B.subtilis中分泌表达时,敲除了wprA蛋白酶基因的B.subtilis168wprA菌株相对于其野生型菌株B.subtilis168分泌表达的总的酶活力下降了36%,再次整合csaA进wprA位点后的B.subtilis168/wprA::csaA菌株,其表达量又恢复到相当于野生型菌株的表达水平.青霉素酰化酶在B.subtilis168wprA-菌株中的表达与野生型相比没有明显差异;而整合csaA分子伴侣进wprA位点后的菌株(B.subtilis168/wprA::csaA),相对于野生型其总的酶活力高出66%,说明分子伴侣CsaA数量的增加可以明显提高酶的表达量,并显示出普遍提高蛋白总活力的作用,而蛋白酶wprA基因的敲除,对某些蛋白的表达量能够产生明显的影响,在提高表达的稳定性方面表现出普遍的促进作用.本实验表达的青霉素酰化酶酶活力(14.7 U/mL)比工业应用中的酶活力(10 U/mL)高出了47%.
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| 关 键 词： | 枯草芽孢杆菌 分子伴侣 CsaA 蛋白酶 wprA |
The Influence of Over-expression Molecular Chaperone of CsaA and Deletion WprA Protease on the Bacillus subtilis Sereting Foreign Protein |
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| JIANG Hong-liang,ZHANG Hong,ZHAO Fu-kun,DING Ming.The Influence of Over-expression Molecular Chaperone of CsaA and Deletion WprA Protease on the Bacillus subtilis Sereting Foreign Protein[J].Journal of Zhejiang Sci-tech University,2011,28(2). |
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| Authors: | JIANG Hong-liang ZHANG Hong ZHAO Fu-kun DING Ming |
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| Affiliation: | JIANG Hong-liang,ZHANG Hong,ZHAO Fu-kun,DING Ming(Laboratory of Proteomics and Molecular Enzymology,Zhejiang Sci-Tech University,Hangzhou 310018,China) |
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| Abstract: | The alkaline pectinase of Bacillus halodurans C-125 and the Penicillin acylase of bacillus megaterium is expressed in the B.subtilis168 strain and the transformation strain(B.subtilis168wprA-,B.subtilis168/wprA:: csaA).Alkaline pectinase secretion level is decreased by 36% when knocking out the wprA gene,while the csaA integrated into the B.subtilis168wprA-strain makes the expression capability to return to the level as well as the wide type B.subtilis168 strain.There is no difference between B.subtilis168w... |
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| Keywords: | Bacillus subtilis molecular chaperone CsaA protease wprA |
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