吐温-80对钝齿棒杆菌产L-赖氨酸的影响

对吐温-80提高L-赖氨酸产量的分子机制进行探究。以钝齿棒杆菌MT-M4 ΔproB为出发菌株，在菌株生长至对数初期36 h时，添加5 mg/mL吐温-80进行摇瓶发酵，通过反转录实时荧光定量聚合酶链式反应（reversetranslate real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR）监控相关基因的转录水平、胞内的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate reduced form，NADPH）水平及α-酮戊二酸脱氢酶复合物（α-oxoglutarate dehydrogenase complex，ODHC）的活力。摇瓶发酵结果表明，添加吐温-80使L-赖氨酸产量提高了215%；RT-qPCR结果表明，编码ODHC的基因odhA、sucB和lpdA、参与ODHC调控的基因pknG、dtsR和ppp以及合成NADPH的磷酸戊糖途径基因zwf的转录水平均发生了变化，其中odhA、sucB、lpdA、pknG及dtsR1基因分别发生了上调，ppp基因下调，相应ODHC活力提高了32.9%；zwf基因上调了17.6 倍，相应胞内NADPH水平提高了137%。因此，在对数生长初期36 h添加吐温-80具有双重功效，既提高了ODHC的表达又使NADPH积累，从而诱导L-赖氨酸的高产。

Effect and Molecular Mechanisms of Tween-80 on L-lysine Production in Corynebacterium crenatum