| 强力霉素人工抗原的制备及鼠源多抗的ELISA鉴定 |
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| 引用本文： | 曹金博,孟继秋,李燕虹,王耀,孙亚宁,胡骁飞. 强力霉素人工抗原的制备及鼠源多抗的ELISA鉴定[J]. 现代食品科技, 2019, 35(12): 182-188 |
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| 作者姓名： | 曹金博 孟继秋 李燕虹 王耀 孙亚宁 胡骁飞 |
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| 作者单位： | 河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,河南郑州450002;河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471003;河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471003;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,河南郑州450002 |
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| 基金项目： | 国家“十二五”科技支撑计划项目（2014BAD13B05）；国家重点研发计划项目（2018YFC1602903）；国家自然科学基金项目（31702218）；河南省自然科学基金项目（182300410038）；河南省科技攻关项目（182102110445；182102310230）；河南省高等学校重点科研项目（18B550001）；河南省动物免疫学重点实验室开放课题（PKLAI20170603） |
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| 摘 要： | 为制备强力霉素（Doxycycline，DC）人工抗原并获得免疫学特性良好的DC鼠源多抗血清。本试验采用琥珀酸酣法在DC分子上引入羧基基团，然后采用改进碳二亚胺法（EDC）将其与载体蛋白偶联制备人工抗原，经紫外扫描（UV）和凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定其偶联效果，以30 μg/只的剂量（人工抗原）免疫4只BALB/c小鼠，并对所获鼠源多抗血清采用间接ELISA和间接竞争ELISA鉴定其免疫学特性。结果表明，人工抗原偶联效果良好，免疫的4只小鼠多抗血清效价均达到1:12800，且均有抑制效果，其中4号小鼠产生的多抗血清效果最佳，半数抑制浓度（IC50）为24.75 ng/mL，与土霉素、金霉素、四环素的交叉反应率分别为3.4%、3.8%、3.0%，与其他兽药及载体蛋白的交叉反应率均小于0.3%，特异性良好。本试验成功合成DC人工抗原并获得免疫学特性良好的DC鼠源多抗血清，为后期单克隆抗体的制备及免疫学快速检测方法的建立奠定良好基础。
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| 关 键 词： | 强力霉素 人工抗原 多抗血清 ELISA |
| 收稿时间： | 2019-07-21 |
Preparation of Artificial Antigen and ELISA Identification of Mouse Polyclonal Antiserum for the Detection of Doxycycline |
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| CAO Jin-bo,MENG Ji-qiu,LI Yan-hong,WANG Yao,SUN Ya-ning and HU Xiao-fei. Preparation of Artificial Antigen and ELISA Identification of Mouse Polyclonal Antiserum for the Detection of Doxycycline[J]. Modern Food Science & Technology, 2019, 35(12): 182-188 |
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| Authors: | CAO Jin-bo MENG Ji-qiu LI Yan-hong WANG Yao SUN Ya-ning HU Xiao-fei |
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| Affiliation: | (1.Key Laboratory of Animal Immunolog, Henan Academy of Agricultural Sciences, Zhengzhou 450002, China)(2.Food and Bioengineering College, Henan University of Science and Technology, Luoyang 471003, China),(1.Key Laboratory of Animal Immunolog, Henan Academy of Agricultural Sciences, Zhengzhou 450002, China)(2.Food and Bioengineering College, Henan University of Science and Technology, Luoyang 471003, China),(1.Key Laboratory of Animal Immunolog, Henan Academy of Agricultural Sciences, Zhengzhou 450002, China)(2.Food and Bioengineering College, Henan University of Science and Technology, Luoyang 471003, China),(2.Food and Bioengineering College, Henan University of Science and Technology, Luoyang 471003, China),(1.Key Laboratory of Animal Immunolog, Henan Academy of Agricultural Sciences, Zhengzhou 450002, China) and (1.Key Laboratory of Animal Immunolog, Henan Academy of Agricultural Sciences, Zhengzhou 450002, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | doxycycline artificial antigen polyclonal antiserum ELISA |
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