摘 要: | 1株产外切菊粉酶的海洋放线菌灰平链霉菌Streptomyces griseoplanus S501发酵粗酶液,经硫酸铵分级沉淀、透析脱盐后,分别采用Sephadex G-75凝胶、DEAE-Sepharose CL-6B离子交换柱层析和SDS聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)分离纯化,得到菊粉酶不同活性组分。纯化倍数为10.42倍,比酶活249.5 U/mg(蛋白),相对分子质量为28.184 k Da。酶学性质研究结果表明,该菊粉酶的最适温度和p H值分别为50℃和5.0。在50℃和p H5.0条件下,以菊粉为底物时,该酶的Km值和vmax值分别为3.83 mg/m L和4.64 mg/(m L·min)。金属离子对酶活性影响实验表明,Mg2+、I-、Li+、Fe3+、Al3+和K+对该菊粉酶酶活有很强的抑制作用,Cu2+、Ca2+和Ag+对该菊粉酶活性具有一定促进作用。
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