表达透明颤菌血红蛋白对圆红冬孢酵母油脂积累的影响

产油酵母的油脂合成是高度耗氧的生物过程,为提高油脂合成过程中细胞利用氧气的能力,将透明颤菌的血红蛋白基因vgb整合到油脂高产菌株圆红冬孢酵母(Rhodosporidium toruloides,R. toruloides)的染色体中。首先构建了透明颤菌血红蛋白基因vgb表达载体pZPK-P_(PGK)-hyg-T_(NOS)-P_(GPD)-vgb-T_(HSP),再通过农杆菌介导转化的方法将其转化至R. toruloides NP11中,获得重组菌株。Western blot和CO差异光谱分析表明,透明颤菌血红蛋白在R. toruloides NP11中成功表达并且具有生物活性。摇瓶发酵结果表明:与出发菌株相比,在氧气充足条件下,重组菌株NG-21的油脂产量提高了18%;在氧气不足条件下,重组菌株NG-22的油脂产量提高了28%;在限氧和不限氧的条件下,透明颤菌血红蛋白均能够促进圆红冬孢酵母的油脂积累。