| 基于酶辅助循环放大和银纳米簇技术构建荧光传感器用于MicroRNA的检测 |
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| 引用本文： | 刘景荣,潘云苓,赵燕苹,陈梅,夏垚坤,兰建明,韩志钟,吴芳,陈敬华. 基于酶辅助循环放大和银纳米簇技术构建荧光传感器用于MicroRNA的检测[J]. 化学试剂, 2016, 0(4). DOI: 10.13822/j.cnki.hxsj.2016.04.015 |
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| 作者姓名： | 刘景荣 潘云苓 赵燕苹 陈梅 夏垚坤 兰建明 韩志钟 吴芳 陈敬华 |
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| 作者单位： | 1. 福州市第一医院中西医结合肿瘤科,福建福州,350009;2. 福建医科大学药学院,福建福州,350108 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(21375017;21105012)，福州市科技计划项目(2013-S-122-4)，福建省自然科学基金杰出青年人才项目(2013J06003)，福建省自然科学基金(2015J01596;2015J05020)，福建省科技厅重点项目(2013Y0045)，福建省卫生系统中青年骨干人才培养项目(2014-ZQN-ZD-26)，福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划资助(JA13130). |
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| 摘 要： | 基于双链特异性核酸酶(Duplex-specific nuclease,DSN)选择性切割DNA单链和DNA保护的银纳米簇的特性,建立了一种新型的荧光传感器用于MicroRNA(MiR-21)的高灵敏检测。当MiR-21存在时,与Cp杂交形成DNA/RNA双链结构,此时在DSN的水解下,释放出探针DNA部分片段和完整的MiR-21。释放出来的MiR-21可再次发生与Cp杂交、DSN酶切等反应,如此反复,可实现一条MiR-21分子与多条探针杂交、酶切的循环过程。经磁分离,上清液中的探针DNA部分片段与Ag+结合并在硼氢化钠(Na BH4)的还原下产生银簇,检测到较强的荧光信号。相反,当MiR-21不存在时,DSN对单链探针无酶切作用,不能水解Cp,经磁分离,上清液中检测不到荧光信号。在最佳条件下,该传感器检测MiR-21的线性范围为50 fmol/L~10 pmol/L,检测限达6 fmol/L,而且具有较好的选择性,有望用于临床实际样本中微量MiR-21的检测。
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| 关 键 词： | 磁珠 双链特异性核酸酶 银纳米簇 MiR-21 荧光生物传感器 |
A Fluorescence Sensor for MicroRNA Detection Based on Nuclease Assisted Target Recycling and Silver Nanoclusters |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | magnetic beads duplex-specific nuclease silver nanoclusters MiR-21 fluorescence biosensor |
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