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MTS染色法测定重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的生物学活性
引用本文:陈红霞,于玉根,张慧娟,黄立勤. MTS染色法测定重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的生物学活性[J]. 中国生物制品学杂志, 2011, 24(1)
作者姓名:陈红霞  于玉根  张慧娟  黄立勤
作者单位:深圳新鹏生物工程有限公司;
摘    要:目的 建立稳定可靠的重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Recombinant human TNF-related apoptosis-induc-ing ligand,rhTRAIL)生物学活性检测方法——MTS染色法。方法采用人非小细胞肺癌细胞(NCI-H460)凋亡-MTS染色法对3批rhTRAIL供试品进行检测,采用四参数回归法计算供试品效价;并对该方法的专属性、精密性和准确性进行验证。结果 3批供试品(20071101、20071102、20071103)的效价分别为7.3×104、8.1×104和9.3×104 U/ml,相关系数(R2)分别为0.998、0.996和0.998。rhTRAIL抗体能完全阻断rhTRAIL与NCI-H460细胞间的应答反应。该方法专属性较好,不同检测板间、不同加样位置、不同工作日间和不同试验人员间检测结果的平均变异系数分别为12%、26%、24%和7%,平均加样回收率为114%。结论 MTS染色法测定rhTRAIL的生物学活性具有较高的准确性和可信度,适用于rhTRAIL生物学活性的常规检测。

关 键 词:TNF相关凋亡诱导配体  生物学活性  MTS

Determination of Bioactivity of Recombinant Human TNF-related Apoptosis-inducing Ligand by MTS Staining
CHEN Hong-xia,YU Yu-gen,ZHANG Hui-juan,HUANG Li-qin. Determination of Bioactivity of Recombinant Human TNF-related Apoptosis-inducing Ligand by MTS Staining[J]. Chinese Journal of Bilogicals, 2011, 24(1)
Authors:CHEN Hong-xia  YU Yu-gen  ZHANG Hui-juan  HUANG Li-qin
Affiliation:CHEN Hong-xia,YU Yu-gen,ZHANG Hui-juan,HUANG Li-qin(Shenzhen Xinpeng Bio-tech Co.Ltd,Shen-zhen 518057,Guangdong Province,China)
Abstract:Objective To develop a stable and reliable MTS staining method for determination of bioactivity of recombinant human TNF-related apoptosis-inducing ligand(rhTRAIL).Methods Three batches of test samples of rhTRAIL were determined by induction of human non-small cell lung cancer NCI-H460 cell apoptosis and MTS staining,and calculated for potency by four-parame-ter regression method,based on which the specificity,precision and accuracy of the developed method were verified.Results The potencies of the three ba...
Keywords:TNF-related apoptosis-inducing ligand(TRAIL)  Bioactivity  MTS  
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