| 不对称合成苯乳酸的酮酸还原酶基因克隆和表达 |
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| 引用本文： | 张玲玲,许国超,倪晔.不对称合成苯乳酸的酮酸还原酶基因克隆和表达[J].食品与生物技术学报,2016,35(9):950-957. |
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| 作者姓名： | 张玲玲 许国超 倪晔 |
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| 作者单位： | 江南大学 生物工程学院，江苏 无锡，214122; 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122,江南大学 生物工程学院，江苏 无锡，214122; 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122,江南大学 生物工程学院，江苏 无锡，214122; 江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 214122 |
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| 摘 要： | 采用分子克隆手段从基因组数据库中获得5个可以不对称还原苯丙酮酸合成手性苯乳酸的酮酸还原酶,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达。比较5个重组酮酸还原酶的酶活、转化率、ee值等指标,来源于干酪乳杆菌的酮酸还原酶LcKAR表现出最高的比活力和选择性。纯酶LcKAR的比活力为0.32 U/mg,在不对称还原反应中遵循Prelog规则,产物为(R)-苯乳酸,且ee99%。对重组大肠杆菌BL21(DE3)/p ET28a-LcKAR的培养基及发酵条件进行优化,最适培养条件为种龄6 h,接种体积分数为3%,诱导剂IPTG浓度为0.6 mmol/L,诱导时间为5 h,经发酵培养后Lc KAR的发酵酶活达到2.17×10~3U/L。
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| 关 键 词： | 苯乳酸 酮酸还原酶 生物催化 不对称还原 发酵优化 |
Cloning and Expression of Ketoacid Reductase for Asymmetric Synthesis of Phenyllactic Acid |
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| ZHANG Lingling,XU Guochao and NI Ye.Cloning and Expression of Ketoacid Reductase for Asymmetric Synthesis of Phenyllactic Acid[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2016,35(9):950-957. |
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| Authors: | ZHANG Lingling XU Guochao and NI Ye |
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