固定化γ-谷氨酰转肽酶催化合成γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸 |
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作者姓名: | 宋希文 周治 姚忠 肖彦羚 徐虹 韦萍 |
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作者单位: | 南京工业大学食品与轻工学院,江苏,南京,210009;南京工业大学食品与轻工学院,江苏,南京,210009;南京工业大学食品与轻工学院,江苏,南京,210009;南京工业大学食品与轻工学院,江苏,南京,210009;南京工业大学食品与轻工学院,江苏,南京,210009;南京工业大学食品与轻工学院,江苏,南京,210009 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划"973"项目 |
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摘 要: | 以环氧基树脂Eupergit C250L为载体对B.subtilis NX-2 GGT进行了共价固定化.固定化酶的最适作用pH为9.0,最适作用温度为60℃.固定化酶的热稳定性和贮存稳定性均较游离酶有显著的提高,经100 d 20个批次转化后,固定化残余酶活仍能保持初始值的80%左右.以固定化酶为催化剂,在反应条件为L-谷氨酰胺(Gln)20 mmol/L、S-苄基-半胱氨酸(S-Bzl-cys)20 mmol/L、酶浓度0.0375 U/mL和pH 9.0条件下,40℃水浴反应22 h,转肽产物S-苄基-y-L-谷氨酰-L-半胱氨酸(S-Bzl-GGC)得率为4.3 mmol/L,较游离酶提高了11.96%.S-Bzl-GGC经酸解脱除保护基后可得γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸,产物纯度可达94.1%.
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关 键 词: | γ-谷氨酰转肽酶 固定化 γ-L-谷氨酰-L-半胱氨酸 酶法合成 |
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