羧甲基琼脂糖微球的制备及其在国产碱性蛋白酶纯化中的应用

以琼脂糖粉末为原料,利用反相悬浮原理制备琼脂糖凝胶微球。所得琼脂糖微球的粒径分布在45～165μm范围内,并对其进行了交联。以自制交联琼脂糖微球为基质,对其进行了羧甲基化反应。依据离子交换容量进行键合量的表征,综合考察了各种反应试剂的用量、反应温度、反应时间等条件对键合量的影响。将所得的羧甲基键合微球用于碱性蛋白酶粗品的分离纯化,结果表明,自制羧甲基弱阳离子交换填料对国产碱性蛋白酶具有较好的分离纯化、除色以及除味等作用,可以达到国外同类产品的效果。     

葡聚糖接枝型高载量金属螯合介质的制备与性能

对琼脂糖凝胶微球进行烯丙基活化,再接枝葡聚糖分子,考察葡聚糖分子量等因素对葡聚糖接枝过程的影响;以葡聚糖接枝琼脂糖凝胶微球为基质,制备亚氨基二乙酸型金属螯合介质,考察葡聚糖接枝过程对金属螯合介质的孔道结构、流通性能和载量等的影响. 结果表明,分子量20~500 kDa的葡聚糖都能均匀分布于琼脂糖凝胶微球内,葡聚糖接枝量随分子量增加而增大,所制的金属螯合介质形貌、粒径及其分布基本不受影响,且具有更好的流通性能,孔道结构比商品介质Ni Sepharose 6FF更丰富. 葡聚糖接枝的金属螯合介质对带组氨酸标签的乳酸脱氢酶和睫状神经营养因子的载量分别达到19和27 mg/mL,较Ni Sepharose 6FF的载量分别提高26.6%和42.0%.     

复乳法制备大孔琼脂糖分离介质与疫苗结合性能研究

大孔分离介质在分离纯化特别是超大生物分子分离纯化领域具有十分重要的应用意义。受材料性质和制备技术所限制,大孔分离介质以聚合物材料最为常见,针对琼脂糖的大孔分离介质较为少见。通过复乳法制备大孔琼脂糖微球,研究制备条件对微球形貌与成孔情况以及粒径与分布等的影响,发现该微球具备微米级超大孔结构,且制备条件对孔道结构的影响呈现一定规律,琼脂糖溶液浓度、内/外油相与水相比例、初乳转速和成球转速等都对成孔性至关重要。激光共聚焦显微镜实验结果表明,衍生后的大孔琼脂糖分离介质对乙肝表面抗原具有良好的结合能力,使其能够完全进入微球内部。与传统琼脂糖介质相比,大孔琼脂糖介质能够更快速、充分结合大分子疫苗,在超大分子分离纯化领域应用前景广阔。     

铁琼脂糖磁性微球的制备和表征

采用反相悬浮包埋法制备了以纳米铁粉为磁核、琼脂糖为壳层的铁琼脂糖磁性微球,其磁响应性比以四氧化三铁为磁核的琼脂糖磁性微球好得多;并对不同粒径的琼脂糖磁性微球表面的活性基团进行了测定,粒径为8.3 μm的铁琼脂糖磁性微球的表面活性羟基数目是4.02×1015个·mg-1.     

基于双流体喷嘴的磁性琼脂糖微球的制备及其蛋白吸附性能探究

针对现有磁性琼脂糖微球(MAM)制备技术工艺流程长、重复性差、难以实现规模化及连续化生产等问题,提出了一种基于双流体喷嘴雾化技术的新型磁性琼脂糖微球制备方法;探究了不同雾化条件下,液滴尺寸变化的规律;在优化后的喷雾条件下,成功制备出球形度高、粒径小、磁响应迅速的磁性琼脂糖微球;将筛分后的微球制备成DEAE阴离子交换剂(DEAE-MAM),并以牛血清白蛋白(BSA)为模型蛋白,探究了不同粒径下的DEAE-MAM的蛋白吸附性能。结果表明,在保证水相性质一致的前提下,喷雾条件通过改变气液比影响液滴尺寸,进而影响微球粒径;粒径最小的DEAE-MAM (d₃₂=36 μm)离子交换容量最大(192.5 μmol/ml),饱和吸附量最高(150.0 mg/ml)。     

石杉碱甲水凝胶微球的制备及体外释放评价

以羟丙基甲基纤维素为原料,二乙烯基砜为交联剂,采用反相悬浮聚合法制备水凝胶微球。采用透射电子显微镜、纳米粒度仪对微球的粒径、形态进行表征。采用超滤离心法收集载药微球,透析袋法考察体外释放度。研究表明,制备的水凝胶微球粒径分布均匀,分散性好,载药量达到3. 8%以上。石杉碱甲水凝胶微球能够缓释石杉碱甲约400 min,所制备的水凝胶微球对石杉碱甲具有一定的缓释作用。     

亚微米SiO_2微球的制备与改性

以正硅酸乙酯(TEOS)为硅源、氨水为催化剂、乙醇为溶剂,通过一种改进的溶胶-凝胶法制备了粒径在400—1000 nm的SiO2微球。为使其在油介质中具有良好的分散性,用三甲基氯硅烷(TMSCl)对所制备的SiO2微球表面进行改性,测定了改性SiO2微球的疏水程度、活化指数及亲水亲油性。扫描电镜及显微分析结果表明:未改性的SiO2微球具有良好的单分散性及球形度,但在润滑油中的分散效果不理想;改性SiO2微球表面疏水程度明显增强,活化指数增大,且在润滑油中分散性良好;并且改性剂三甲基氯硅烷的用量和改性时间对改性效果影响显著。     

改性琼脂糖微球固定化甘油脱氢酶的研究

通过膜乳化法制备琼脂糖微球,利用环氧氯丙烷活化琼脂糖微球,并与聚乙烯亚胺(PEI)反应引入氨基,得到胺化琼脂糖微球。利用扫描电子显微镜(SEM)、X射线能谱(EDS)、X射线光电子能谱(XPS)、傅立叶变换红外光谱(FTIR)等手段对微球的形貌和结构进行表征。通过戊二醛(GA)共价固定甘油脱氢酶(GlyDH),并催化甘油生成1,3-二羟基丙酮(DHA)。结果表明,膜乳化过程可改善载体的球形度,PEI分子量对接枝微球的N元素含量有显著影响。固定化酶的储存稳定性和循环使用性均高于游离酶。     

反相悬浮聚合法制备交联葡聚糖凝胶微球及其在脂质体与药物分离中的应用

以葡聚糖4万为原料,环氧氯丙烷为交联剂,甲苯为有机分散相,选用合适的分散剂,利用反相悬浮聚合的原理制备了葡聚糖凝胶微球。以微球的球形度、粒径分布范围以及吸水溶胀度等性能为衡量标准,考察了有机分散相的种类、搅拌速度、实验温度、反应时间以及分散剂的用量对制备效果的影响,确定了最优的制备条件。同时,将所制葡聚糖微球应用于脂质体与药物的分离检测,以测定其凝胶分离性能。结果表明,所制交联葡聚糖凝胶微球具有良好的球形度、分散性以及吸水溶胀性,并具有优良的凝胶过滤分离性能。     

影响二氧化硅气凝胶隔热涂料热导率的因素

采用溶胶凝胶法及雾化技术制备了二氧化硅气凝胶微球,同时制备了二氧化硅气凝胶隔热涂料。利用扫描电镜（SEM）对涂料的微结构进行观测,采用激光粒度检测仪对二氧化硅气凝胶微球的尺寸进行检测,采用Hot Disk热导率仪测量了二氧化硅气凝胶隔热涂料的热导率。结果显示：根据SEM 图像,气凝胶微球在涂料中形成明显团聚,且在气凝胶体积分数较高时,涂料中气孔增多。此外,小粒径气凝胶微球更容易形成团聚。由于气凝胶微球热阻极大,气凝胶隔热涂料的热导率随气凝胶微球含量的增加而下降。气凝胶微球的团聚相比均匀分散不利于热导率的降低,而孔隙的增多则有利于涂料热导率下降,因为空气的热阻高。小粒径微球的界面热阻比大粒径微球更大,导致小粒径微球制备的隔热涂料热导率低,混合粒径使气凝胶微球堆积密度增大,有利于降低涂料的热导率。     

超大孔聚苯乙烯微球固定蛋白质

采用琼脂糖对孔径为300~500 nm的超大孔聚苯乙烯(MPS)微球进行亲水化修饰,并在修饰后的表面上偶联病毒蛋白颗粒(RV),用于蛋白质的分离纯化实验. 结果表明,经过修饰的MPS层析介质具有优异的流体力学性能,层析过程的最高流速可达1120 cm/h,对病毒蛋白颗粒的固定量为0.638 mg/g,是商品化介质Sepharose 4FF的2倍. 采用RV-MPS介质对病毒蛋白颗粒抗体进行了分离纯化,收率为29.22%,高于Sepharose 4FF的18.92%.     

Synthesis,surface characteristics,and electrochemical capacitance of Cu-doped carbon xerogel microspheres

Small-amplitude oscillatory shear tests were used to determine the rheological properties of a copper acetate-doped resorcinol–formaldehyde mixture at between 30 and 40 °C. The apparent activation energy of the sol–gel transition was 76.6 ± 0.6 kJ/mol. Organic gel microspheres were only obtained when the sol was emulsified immediately before the gelation point and not at the gelation point itself, due to the fast gelation kinetics of the copper acetate-doped resorcinol–formaldehyde mixture. The microspherical shape was preserved after carbonization. Cu-doped carbon xerogel microspheres were steam-activated at 840 °C. All samples comprised isolated well-formed microspheres, whose size increased with higher degree of activation. The surface area and porosity varied with the activation degree. Copper was detected as CuO, which acted as gasification catalyst during activation, and its size increased with higher activation degree. Electrochemical measurements were conducted with a three-electrode cell in 1 M H₂SO₄. A very large volumetric capacitance, 146 F/cm³, was found for the 30%-activated Cu-doped activated carbon xerogel, attributable to the high particle density resulting from the very compact packing of the microspheres. This sample also showed the lowest equivalent series resistance, due to its pore texture and high surface Cu content.     

壳聚糖-琼胶复合微球的制备及其药物释放性能

采用小分子离子交联法制备了pH值敏感的壳聚糖-琼胶复合微球,对壳聚糖-琼胶复合微球的粒径、形貌、pH值敏感性等进行了表征.以茶碱为模型药物研究了壳聚糖-琼胶复合微球的药物释放性能,结果发现一定量琼胶的引入有助于改善壳聚糖微球的药物缓释性能.     

用于单克隆抗体纯化的仿生多肽超大孔PGMA微球制备及其性能

以仿生多肽配基FYEILHC为亲和配基、以葡聚糖修饰的聚甲基丙烯酸缩水甘油酯[Dextran-poly(glycidyl methacrylate), Dextran-PGMA]超大孔微球为基质，制备用于单克隆抗体纯化的仿生多肽超大孔PGMA微球，在环氧氯丙烷中滴加2 mol/LNaOH使其表面衍生出环氧基，在表面修饰FYEILHC；用扫描电镜表征微球表面形貌，用AKTA蛋白纯化系统考察了Dextran-PGMA微球和琼脂糖微球对抗体的动态吸附量随线性流速的变化。结果表明，偶联FYEILHC后Dextran-PGMA微球仍能保持其大孔结构，在923 cm/h线性流速下，其对抗体的动态吸附量仅下降约8%，而琼脂糖微球的动态吸附量则迅速下降25%。表明在较高流速下，抗体在Dextran-PGMA微球上的传质性能较好。吸附?用0.1 mol/L NaOH原位清洗重复40次后，Dextran-PGMA微球对抗体的动态吸附量约为(21?1) mg/mL，表明微球具有良好的化学稳定性；血清中回收的抗体纯度为95.0%，表明仿生多肽亲和介质具有从复杂生物样品中纯化抗体的巨大潜力，可满足高流速、高通量抗体分离纯化需求。     

聚丙烯酸和聚苯乙烯磺酸钠调控制备多孔碳酸钙

多孔碳酸钙微球是一种良好的新型缓释载体,在药物缓释、农药控释、涂层防护、橡胶抗老化等领域有广阔的应用前景,合成具有丰富纳米孔道的碳酸钙微球是实现缓释的关键。以氯化钙和碳酸钠为反应原料,选用聚丙烯酸（PAA）为表面活性剂、聚苯乙烯磺酸钠（PSS）为晶型调控剂,通过复分解法制备出球霰石型多孔碳酸钙微球。采用扫描电子显微镜、透射电子显微镜、红外光谱仪、粒度分析仪、比表面及孔隙度分析仪、热重分析仪等手段对获得产物进行表征分析,并研究PAA、PSS浓度对碳酸钙微球形貌和晶型的影响。结果表明,在反应温度为80℃、搅拌速率为600 r/min、PAA和PSS的质量浓度分别为3.0 g/L和3.6 g/L时,可制备出粒径均一、形貌良好、孔隙率较大的多孔碳酸钙微球。     

环氧氯丙烷活化琼脂糖凝胶过程强化及性能评价

环氧氯丙烷的低水溶性和活化过程中环氧基水解制约了高活化效率的获得. 通过引入亲水性有机试剂二甲基亚砜,研究了提高Sepharose CL-6B介质环氧基活化密度的方法. 研究结果显示,二甲基亚砜溶剂体系消除了琼脂糖凝胶与环氧氯丙烷之间的相界面,形成了均相反应体系,强化了活化反应. 在10%(j)环氧氯丙烷、0.8 mol/L氢氧化钠及反应时间2.5 h的优化条件下,环氧基活化密度可达100 mmol/mL以上. 上述活化过程对介质的性能没有明显影响. 活化介质对5-氨基吲哚的偶联密度达到95.3 mmol/mL,较常规活化方法提高75%以上.     

通过廉价硅源制备二氧化硅微球及其粒径控制

将廉价的硅酸钠作为硅源生产二氧化硅微球有着重要的意义。以硅酸钠为硅源,聚乙二醇（PEG）为结构导向剂,在超声波辅助下,成功合成出高分散的二氧化硅微球。探索了PEG及超声波对产物形貌的影响,讨论了反应温度、pH、PEG相对分子质量与产物粒径的关系。结果表明,PEG能够引导产物成球,超声波可以提高产物的分散性,升高温度及pH会降低产物粒径,增加PEG的相对分子质量会提升产物粒径。当控制温度为40 ℃、pH为3.5、聚乙二醇相对分子质量为2 000时,所得的产品分散性较好,粒径为6.34 μm。     

Preparation and characterization of poly‐DL‐lactide–poly(ethylene glycol) microspheres containing λDNA

Polylactide (PLA) and a block copolymer, poly‐DL ‐lactide–poly(ethylene glycol) (PELA) were synthesized by bulk ring‐opening polymerization initiated by stannous chloride. A linear DNA molecule, λDNA, was used as the model DNA. PLA, PELA, λDNA‐loaded PLA and PELA microspheres were prepared by the solvent‐extraction method based on the formation of multiple w₁/o/w₂ emulsion. The particle‐size distribution, surface morphology, and DNA loading characterized the microspheres. The mean diameter of λDNA‐loaded PELA microspheres was proved to be 3.5 μm. The integrity of the λDNA molecules, after preparing the microspheres, was determined by agarose gel electrophoresis. The result suggested that most of the λDNA molecules could retain their integrity after being encapsulated by PELA. The PELA microspheres could also prevent λDNA from being degraded by DNase. The in vitro degradation and release of PLA, PELA, and λDNA‐loaded PELA microspheres were carried out in a pH 7.4 buffer solution at 37°C. Quantitatively, evaluating the molecular weight reduction, the mass loss, the particle‐size changes, and the particle‐size distribution changes also monitored the degree of degradation. The release profile was assessed by measurement of the amount of λDNA present in the release medium at determined intervals. The degradation profiles of the PELA microspheres were quite different from those of the PLA microspheres. The introduction of the hydrophilic poly(ethylene glycol) domain in PLA and the presence of λDNA within the microspheres exhibit the apparent influence on the degradation and release profiles. A biphasic release profile was proved, that is, an initial burst release during the first days, then a gradual release. It was demonstrated that the PELA microspheres could be used potentially as a controlled release‐delivery system for λDNA. © 2002 Wiley Periodicals, Inc. J Appl Polym Sci 86: 2557–2566, 2002     

乳化法制备海藻酸钙/聚组氮酸微胶囊

采用乳化法制备海藻酸钙微球及海藻酸钙/聚组氨酸载药微胶囊,并考察不同海藻酸钠浓度、氯化钙浓度对微球表面形态、粒径分布、载药性能及微胶囊控制释放性能的影响。结果表明海藻酸钠浓度主要影响微球的粒径大小,氯化钙浓度主要影响微球的分散程度及粒径分布,微球载药量均随海藻酸钠浓度及氯化钙浓度的增加而减小,所制备的微胶囊均无明显的突释现象。