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1.
2.
以蓖麻油基阴离子水性聚氨酯为载体,采用生物3D打印技术制备含碳酸酐酶的生物活性聚氨酯涂层,并与传统涂覆法制备的含酶涂层进行对比。通过动态光散射、红外、扫描电镜-X射线能谱、热重、接触角等各种手段对涂层中酶与水性聚氨酯之间的相互作用进行了分析表征。结果表明,在形成生物活性涂层过程中,碳酸酐酶是通过与聚氨酯链段上阴离子基团的静电吸引被固定在聚氨酯涂层中。催化活性结果表明,与传统涂覆法相比,涂层的酶活回收率为50.51%,比传统涂覆法提高了4倍。这可能是由于生物3D打印技术制备的含酶涂层更薄、更均匀,表面更平滑。 相似文献
3.
对琼脂糖凝胶微球进行烯丙基活化,再接枝葡聚糖分子,考察葡聚糖分子量等因素对葡聚糖接枝过程的影响;以葡聚糖接枝琼脂糖凝胶微球为基质,制备亚氨基二乙酸型金属螯合介质,考察葡聚糖接枝过程对金属螯合介质的孔道结构、流通性能和载量等的影响. 结果表明,分子量20~500 kDa的葡聚糖都能均匀分布于琼脂糖凝胶微球内,葡聚糖接枝量随分子量增加而增大,所制的金属螯合介质形貌、粒径及其分布基本不受影响,且具有更好的流通性能,孔道结构比商品介质Ni Sepharose 6FF更丰富. 葡聚糖接枝的金属螯合介质对带组氨酸标签的乳酸脱氢酶和睫状神经营养因子的载量分别达到19和27 mg/mL,较Ni Sepharose 6FF的载量分别提高26.6%和42.0%. 相似文献
4.
5.
建立了采用高效液相色谱法快速测定发酵液中蔗糖、莽草酸和芳香族氨基酸含量的方法,为微生物发酵生产莽草酸的工艺控制提供便捷. 色谱条件为:Hypersil APS-2色谱柱(5 mm, 250 mm×4.6 mm),检测波长215 nm,示差检测器和紫外检测器联用,流动相为pH 2.5的磷酸水溶液和乙腈(体积比20:80),柱温30℃,流速1.0 mL/min,进样量10 mL. 在该条件下所测各物质的线性回归方程相关系数均大于0.9986,加样回收率为95%~105%,相对标准偏差均小于2.0%. 相似文献
6.
利用静电纺丝法制备含LiCl的聚氨酯(PU)纳米纤维,用牛血清白蛋白(BSA)对纤维亲水改性,于其上固定b-D-半乳糖苷酶,提高酶在油水两相介质中催化转糖苷反应的活力. 结果表明,以PU浓度26%(w)的电纺液制备的直径240~300 nm的PU纤维膜在LiCl辅助作用下吸附BSA高达222 mg/g,使纤维膜的水接触角由103.7o降至77.3o. 改性PU膜固定化酶比活力为1.59 U/mg,而未改性PU膜仅为其79.2%. 改性膜固定化酶55℃下的活力半衰期高达游离酶的14倍,在4℃下储存45 d活力仍保持80%,而游离酶活力仅剩余16.3%;改性膜固定化酶重复催化42次转糖苷反应活力仍能保持31%. 相似文献
7.
微球材料的粒径均一性和结构可控性直接影响其应用效果,这对过程工程提出了挑战。在发展微孔膜乳化过程制备均一乳液和微球的基础上,对均一乳液的形成机理进行了研究,通过对液滴形成过程的控制,在油/水、水/油、水/油/水等体系成功制备出了均一微球。通过发展微球结构演变过程的定量研究方法,成功对微球结构进行了调控;针对生化工程对超大孔微球的重要需求,发展了超大孔微球制备方法,实现了孔径在100 nm到微米级的调控。研究了粒径均一性和结构对其应用效果的影响。微球应用于生物分离介质时,粒径均一性提高了蛋白质的分离度;超大孔微球可使超大生物分子快速进入介质内部,显著提高纯化回收率。微球应用于胰岛素口服药物载体时,粒径对其在消化道的分布有显著影响,中空-多孔微球显示了最佳的降血糖效果。 相似文献
8.
用盐析与疏水层析相偶合快速分离提纯猪胰激肽释放酶 总被引:4,自引:0,他引:4
将疏水层析技术用于从猪胰脏中分离纯化激肽释放酶,建立了一种简便、快速的分离提纯方法:将粗品溶解后经过硫酸铵沉淀处理,然后经过Butyl Sepharose FF疏水层析后得到目标蛋白,分析其纯度大于500U/mg,盐析和疏水两步纯化的收率大于85.0%,同时比较了Phenyl Sepharose FF,Octyl Sepharose FF和Butyl Sepharose FF三种疏水介质分离纯化胰K的效果,本实验工艺与传统工艺相比,具有操作简单、快速、回收率和纯化倍数高等优点,有望成为一种从动物组织中快速分离纯化药用蛋白质的有效技术平台。 相似文献
9.
以快流速琼脂糖凝胶为基质,采用直接偶联法制备丁基琼脂糖疏水层析介质. 考察了影响反应的主要因素,通过四因素三水平正交实验和单因素实验,确定丁基琼脂糖疏水层析介质的优化反应条件为:反应温度45℃,反应时间45 min,催化剂三氟化硼乙醚用量0.02 mL/g. 在此条件下严格控制琼脂糖凝胶的含水量,改变丁基缩水甘油醚用量,制备了不同丁基密度的丁基琼脂糖疏水层析介质. 用不同密度的系列介质考察对牛血清白蛋白的吸附性能,初步研究了配基密度与吸附性能的关系;研究了疏水层析介质的机械稳定性和化学稳定性. 结果表明,其各项性能良好,具有广阔的应用前景. 相似文献
10.
膨胀床吸附高效纯化牛血红蛋白 总被引:4,自引:1,他引:3
探索了将膨胀床吸附层析应用于动物血液蛋白质的提取,尝试了直接从牛血红细胞破碎液中纯化血红蛋白.对该过程采用的吸附介质及pH值、离子强度、温度、洗脱条件等因素对高铁血红蛋白生成、产品纯度以及回收率等的影响进行探索.选择了最佳吸附介质Streamline SP,确定了优化的吸附条件为:吸附过程选用离子强度为10mmol8226;L-1的磷酸盐缓冲系统,进料线流速3.3cm8226;min-1,进料pH值6.6,改变缓冲液pH值为7.2进行洗脱,操作温度4℃.该技术省去了离心去除碎片步骤,有效地控制了纯化过程中无载氧能力的高铁血红蛋白的生成,动态吸附容量达到70~75mg8226;ml-1,只经一步操作产品纯度达电泳纯,高铁血红蛋白含量仅为5.4%.与现有的膜过滤-层析纯化方法相比,膨胀床吸附法操作时间短,提取收率高,产品活性损失小,是一种简捷、高效、适合工业放大的天然血红蛋白制备方法. 相似文献