抗辐射球菌pprI基因活体电转染救治小鼠γ射线损伤的实验研究

为研究抗辐射球菌pprI基因活体电转染对哺乳动物急性放射损伤的影响,探讨一种新的救治放射损伤的转基因技术。将自行构建的pCMV-HA-pprI质粒注入接受γ射线照射的小鼠肌肉内,采用活体基因电转导技术将该基因导入细胞内,观察照后第1、7、14、28和35天小鼠死亡率、血细胞计数以及骨髓细胞、脾脏和胸腺淋巴细胞凋亡的变化。结果显示,6Gyγ射线可引起小鼠急性致死性放射损伤,转基因组小鼠死亡率(1/10)明显低于单纯照射组小鼠死亡率(4/10)。与单纯照射组和空载体转染组比较,pprI基因转染组小鼠外周血白细胞总数及红细胞总数于照后第7天显著增高(p0.05);血小板数于第7、14天显著增高(p0.05);血淋巴细胞百分率于照后35天恢复正常;pprI基因转染组脾细胞凋亡率于第7、14、28天显著降低(p0.05);胸腺细胞凋亡率于第1、7、14、35天显著降低(p0.05);骨髓细胞凋亡率于第1、7、14和28天显著降低(p0.05),并且胸腺细胞和骨髓细胞凋亡率均于照后28天恢复正常。结果表明,抗辐射菌pprI基因活体电转染对动物急性致死性放射损伤具有明显的防治作用。     

超分割放射对HeLa S-3球体的生长和细胞动力学的效应

临床上应用超分割放射治疗疗效不一,为了了解超分割放射的生物学特点,本实验采用200μm直径HeLaS-3球体为模型,从生长、集落形成率和细胞周期变化(用流式细胞计)等方面比较单次放射,每日一次2 Gy常规放射和两组超分割放射对人体肿瘤细胞的增殖和动力学的影响。 结果:1,在相同总剂量条件下,超分割放射比常规放射和单次放射抑制球体生长作用小。2,球体受放射后由胰酶消化分散成单细胞,其集落形成率以超分割放射组为高。与第一结果相一致,提示在五天疗程中细胞有一定修复和再分布发生。3,细胞周期变化检测表明放射后都有G_2+M期细胞比例增加,伴以G_1和S期细胞比例减少。常规放射后G_2+M期细胞比例较为恒定,而超分割放射后波动大。放射后RNA含量无明显变化。 如采用较大直径内含乏氧细胞的球体为模型,在分割放射期间还可能有再充氧发生,实验结果可能和本实验差异较大。     

复方树莓籽粉对辐照小鼠骨髓细胞的防护作用

探讨复方树莓籽粉水溶液对急性放射性损伤小鼠骨髓细胞的影响及防护作用。建立小鼠急性放射性损伤模型,设立空白对照组、模型对照组及不同浓度复方树莓籽粉溶液处理组(低、中、高剂量组),观察辐照后各组小鼠骨髓细胞有核细胞数、微核率、细胞周期及线粒体膜电位的变化情况。实验结果表明,与空白对照组比较,模型对照组变化均非常显著(p0.01)。与模型对照组比较,复方树莓籽粉中、高剂量组有核细胞数分别升高78.2%(p0.01)、116.9%(p0.01);高剂量组微核率减少27.3%(p0.01);中剂量组细胞周期G1期、S期,高剂量组S期细胞比例升高(p0.05),高剂量组G1期细胞比例显著升高(p0.01);中、高剂量组骨髓细胞线粒体膜电位显著升高(p0.01)。实验结果提示,复方树莓籽粉能升高骨髓细胞数,降低骨髓细胞微核率,升高骨髓细胞线粒体膜电位,减少骨髓细胞周期阻滞,抑制辐射损伤骨髓细胞的细胞凋亡,可能对辐照导致的骨髓细胞损伤有防护作用。     

脑胶质瘤细胞SHG-44的热、放射敏感性及Fas/FasL表达

观测加热联合放射对SHG-44细胞的影响及相关基因Fas／FasL的表达。采用细胞集落法及流式细胞术观察加热对脑胶质瘤细胞SHG-44放射后集落形成的影响和凋亡的变化，并用RT—PCR法检测Fas／FasL表达。结果表明，放射 42℃加热(加热时间40min)较单纯放射(2Gy)的细胞集落明显减少，热增强比(TER)为1．95；空白对照组、单纯放射组、放射 加热组凋亡比率分别为：20．2、29．3、59．1；Fas在3个实验组中均表达，但FasL仅在单纯放射组、放射 加热组中表达。热能明显增加脑胶质瘤细胞SHG-44的放射敏感性，也表明凋亡与Fas／FasL有关。     

维生素D对60Co辐射损伤小鼠的保护作用

为研究维生素D对基因组稳定性作用,观察维生素 D 对60Co 辐射损伤小鼠外周血象、骨髓嗜多染红细胞(Polychromatic erythrocytes,PCE)微核率和骨髓有核细胞(Bone marrow cells,BMC)细胞周期和凋亡的影响.使用60Co辐射制备损伤模型,维生素D制剂(阿法骨化醇胶丸)灌胃,观察外周血象、PCE 微核率(Giemsa法)的变化,并用流式细胞仪分析BMC细胞周期和凋亡情况.结果显示,小鼠辐射后外周血白细胞、血小板数显著下降,骨髓造血损伤,染色体损伤,而维生素D能在一定程度上促进外周血象的恢复,抑制微核率的发生.流式细胞仪分析表明,辐射后 24h,维生素D干预组,BMC的G0/G1期细胞比例较辐射损伤组明显减少,G2期和S期细胞较辐照组增多.这说明维生素D可能成为-个新的辐射防护剂.     

西咪替丁对伽马射线辐照小鼠免疫功能的保护作用

雄性C57小鼠60只平均分为6组:正常对照组(0 Gy)、模型对照组(1.0 Gy)、阳性药对照组(1.0 Gy+523片)、西咪替丁(Cimetidine,CMD)低、中、高剂量组(1.0 Gy+33.3、1.0 Gy+100、1.0 Gy+300 mg/kg),采用60Cog射线全身照射至吸收剂量1.0 Gy,剂量率为8.33 m Gy/min。CMD于照射前连续灌胃给药6 d,每天1次,照射后5 h给药1次。照射后24 h检测脾脏淋巴细胞凋亡率、T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞数和血清中IL-2、IL-4、IL-6、IL-12、IFN-g和TNF-α含量。结果表明:与正常对照组比较,照射后24 h,小鼠脾脏淋巴细胞凋亡率显著增加(p0.01),CD3~+、CD3~+CD8~+T细胞和CD3~-CD19~+B细胞数量均下降(p0.01),血清中的IL-4、IL-12和TNF-α含量显著降低(p0.01,p0.05);与辐照模型组比较,CMD各剂量组脾脏淋巴细胞凋亡率显著下降(p0.01),CMD给药组血清中IL-4、IL-6、IL-12、TNF-α和(40)FN-g含量显著增加(p0.01,p0.05),CMD高剂量组的CD3~+、CD3~+CD4~+和CD3~+CD8~+T细胞及CD3~-CD19~+B细胞数量均显著上升(p0.01,p0.05)。结果提示,CMD可有效改善g射线辐照小鼠的免疫功能,具有较好的辐射保护作用。     

依达拉奉对小鼠造血系统辐射损伤的防护作用

随机区组法将20只C57BL/6小鼠分为对照组、依达拉奉组、4 Gy照射组、4 Gy照射+依达拉奉组,每组5只小鼠。依达拉奉用生理盐水稀释配制成浓度为45mg/mL的溶液。依达拉奉组和4G y照射+依达拉奉组小鼠于照射前30 min腹腔注射依达拉奉;对照组和4 Gy照射组小鼠于照射前30 min腹腔注射生理盐水;4 Gy照射组和4 Gy照射+依达拉奉组小鼠接受~(137)Cs γ射线全身照射至吸收剂量4 Gy,剂量率0.99 Gy/min。辐照后15 d处死小鼠,血细胞分析仪检测外周血细胞计数;流式细胞术检测造血干细胞(Hematopoietic stem cell,HSC)和造血祖细胞(Hematopoietic progenitor cell,HPC)比例,及骨髓中造血干/祖细胞的活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平;粒系-巨核系克隆形成数目(Colony forming unit-granulocyte macrophage,CFU-GM)检测骨髓造血干/祖细胞增殖能力。结果表明:与对照组比较,4 Gy照射组小鼠外周血白细胞(White blood cell,WBC)、红细胞(Red blood cell,RBC)、血小板(Blood platelet,PLT)数目分别降低74.16%、16.63%、15.04%;骨髓中HPC、LSK(Lin~-Sca-1~+c-kit~+)、CD34~+LSK细胞比例分别降低50.99%、38.51%、14.84%;骨髓细胞CFU-GM形成数目减少93.44%;CD34-LSK细胞比例增加1.74倍;HPC和LSK细胞的ROS水平分别升高44.11%和61.43%;与4 Gy照射组相比,4 Gy照射+依达拉奉组小鼠外周血WBC数、RBC数分别增加58.82%、9.3%;骨髓中HPC、LSK、CD34~+LSK细胞比例分别增加1.53倍、1.5倍和14.81%;骨髓细胞CFU-GM形成数目增加57.58%;CD34-LSK细胞比例降低49.17%;HPC和LSK细胞的ROS水平分别降低38.94%和55.91%(p0.05)。结果提示,依达拉奉对电离辐射诱导的造血系统损伤具有一定的保护作用。     

耐辐射球菌PprI蛋白对急性放射损伤小鼠防护作用的初步研究

研究耐辐射球菌PprI蛋白对哺乳动物急性放射损伤的防护作用,初步探讨其作为一种新的抗辐射蛋白的作用机制。将PprI蛋白或生理盐水注射入小鼠肌肉内,观察辐照后第1、7、14、28天小鼠外周血象以及小鼠骨髓、胸腺和脾脏淋巴细胞的凋亡情况。研究结果表明：与生理盐水注射组相比,PprI蛋白注射组外周血白细胞计数于照后第28天显著增高（p〈0．05）;外周血小板数和淋巴细胞百分率于照后第1、7天显著增高（p〈O．05）;PprI蛋白注射组脾脏淋巴细胞凋亡率在照后第1、7、14天明显降低（p〈0．05）;胸腺淋巴细胞凋亡率于照后第14和28天明显降低（p〈0．05）;骨髓细胞凋亡率在照后第1、14和28天明显降低（p〈0．05）;并且骨髓细胞凋亡率于照后第28天基本恢复正常。上述结果初步表明,耐辐射球菌PprI蛋白对哺乳动物急性放射损伤有着明显的防护作用。     

沉默生存素基因增强人肝癌细胞SMMC-7721放射敏感性

为探讨沉默生存素(Survivin)基因对人肝癌细胞SMMC-7721放射敏感性的影响,利用靶向Survivin基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)质粒pGenesil-survivin,采用阳离子脂质体介导法转染SMMC-7721细胞后48 h,分别以RT-PCR和Western blot法检测Survivin基因mRNA和蛋白表达,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,克隆存活实验检测细胞放射敏感性的变化。结果表明,转染质粒pGenesil-survivin后48 h,SMMC-7721细胞Survivin基因mRNA和蛋白表达水平与对照和阴性干扰组相比明显降低(p0.05);转染后第1—4 d,细胞增殖活性与对照组相比明显降低(p0.05或p0.01);转染后48 h,细胞阻滞于G2/M期(p0.001),凋亡百分率明显高于对照组(p0.001);转染后SMMC-7721细胞D0值减小,放射敏感性增强,增敏比为1.24。结果提示,沉默生存素基因可增强人肝癌细胞SMMC-7721放射敏感性。     

CpG-ODN对12C6+离子照射所致胸腺损伤的防治作用

为了探讨CpG-ODN对~(12)C~(6+)离子照射所致胸腺损伤的防治作用,C57BL/6L小鼠受到5 Gy~(12)C~(6+)离子全身照射后观测其30 d存活率,计算照射后1 d和3 d胸腺指数。使用苏木精-伊红染色法评估胸腺组织病理学变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法检测胸腺细胞凋亡;免疫组化法检测γ-H2AX以判断DNA双链断裂水平;免疫荧光法检测外周血中CD3~+T细胞数量。实验结果显示,~(12)C~(6+)离子照射后使用CpG-ODN处理小鼠存活率提高50%,胸腺组织损伤减轻,发生凋亡和出现DNA双链断裂的细胞数量减少,外周血中CD3~+T细胞数量增加。这些表明CpG-ODN能够减轻~(12)C~(6+)离子照射所致的胸腺损伤,其原因可能与抑制胸腺细胞凋亡和减少细胞内DNA双链断裂有关。     

氯霉素酶联免疫分析方法的建立

以兔抗氯霉素多抗为包被抗体,氯霉素（CAP）辣根过氧化物酶连接物为标记物,四甲基联苯胺（TMB）为显色底物,建立了氯霉素直接竞争酶联免疫分析（CAP-EIA）方法.本方法灵敏度为0.046 μg /L,批内变异系数＜10%,批间变异系数＜24%,回收率62%～145%.用牛奶样品预处理所得上清液为稀释液做得稀释实验,相关方程为y=3.988x-0.234, 相关系数为0.999.标准曲线范围为0.1～10 μg /L.     

甲状腺球蛋白测定的临床意义及影响因素

甲状腺球蛋白(Tg)是分化型甲状腺癌(DTC)的肿瘤标志物。定期随访血清Tg有助于对DTC复发和转移的诊断、病人预后的评价和监测治疗效果。目前临床上常用放射免疫分析法(RIA)和非放射性的免疫量度分析法(IMA)测量血清Tg。但这些方法存在较多技术问题,使其临床应用受到了限制,主要有:方法间的变异较大、灵敏度不够高、批内精确度不够好、高浓度Tg的钩变效应(hook effect)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb)的干扰等。其中TgAb的干扰是临床上最常见的问题。     

中国北方大气中有机卤素污染物的污染水平

应用仪器中子活化分析(INAA)及气相色谱质谱联用技术(GC/MS)研究了PUF大气被动采样器采自全国31个点的大气样品中的可萃取有机氯/溴/碘(EOCl/Br/I)和多氯联苯(PCBs).结果表明,大气中卤素污染物质量浓度最高的点大部分分布在城区,且呈现沿城市到乡村的下降趋势;在交通枢纽地区大气中EOCl的质量浓度要高于远离交通枢纽的采样点,机动车尾气的排放是大气中有机氯污染物的重要来源之一;工业也是大气中有机氯污染物的主要来源.84种PCBs异构体分析结果表明,大气中PCBs主要以低氯代PCBs为主,Cl2-CB占总PCBs的41%, Cl3-CB含量最高,占总量的43%,其余异构体含量随取代氯原子的增加而下降,这种异构体的分布特征与我国所生产和使用的PCBs"指纹谱"非常相近,且PCBs异构体的分布特征没有地域差异,这表明大气环境中PCBs主要来自工业污染,且城市地区是我国大气中PCBs的主要来源.在所有已测定的样品中已知PCBs的氯在总EOCl中的比例不足1.0%,大气中绝大部分的有机氯为未知化合物.     

Parameters Optimization of Laser-Induced Breakdown Spectroscopy Experimental Setup for the Case with Beam Expander

Improvement of measurement precision and repeatability is one of the issues cur?rently faced by the laser-induced breakdown spectroscopy (LIBS) technique, which is expected to be capable of precise and accurate quantitative analysis. It was found that there was great poten?tial to improve the signal quality and repeatability by reducing the laser beam divergence angle using a suitable beam expander (BE). In the present work, the influences of several experimental parameters for the case with BE are studied in order to optimize the analytical performances: the signal to noise ratio (SNR) and the relative standard deviation (RSD). We demonstrate that by selecting the optimal experimental parameters, the BE-included LIBS setup can give higher SNR and lower RSD values of the line intensity normalized by the whole spectrum area. For validation purposes, support vector machine (SVM) regression combined with principal component analysis (PCA) was used to establish a calibration model to realize the quantitative analysis of the ash content. Good agreement has been found between the laboratory measurement results from the LIBS method and those from the traditional method. The measurement accuracy presented here for ash content analysis is estimated to be 0.31%, while the average relative error is 2.36%.     

电离室充不同气体的饱和特性实验研究

对体积为1 L的球形不锈钢高气压电离室,用实验方法测量了5种气体（Ar、N2、He、Kr和Xe）的饱和特性.本文主要介绍了测量方法及其结果.结果表明,在相同的充气压力下,He气最容易饱和,Xe气最不容易饱和,Ar气和N2气的饱和电压相近.     

Analysis of PWR SBO sequences with RCP passive thermal shutdown seals

The operation of recently implanted low-leakage seals after Fukushima has altered the analysis of classical PWR Station Blackout (SBO) sequences , as Seal Loss of Coolant Accident (SLOCA) is no longer one of the dominant factors in the accident progression . An analysis of different management strategies in non-SLOCA sequences has been performed by means of the Integrated Safety Assessment (ISA) methodology using the SCAIS-MAAP model of a 3-Loop PWR Westinghouse design. Through the use of the Damage Domain concept(i.e. the region of the uncertain crew actuation times or physical parameters space where each damage limit is exceeded for each sequence), the times for reaching different damage limits are obtained. Results evidence the positive impact of low-leakage seals, which greatly increase the margin to core uncoveryand reduce core damage frequency. Results also allow concluding that an SBO is dominated, namely by the Auxiliary Feed-Water (AFW) mass flow(turning blind AFW management into an essential procedure), SLOCA (in case the new low-leakage seals fail or they are not present), an excessive AFW mass flow (leading to Turbine-Driven Pump failure) and the DC failure time (losing control valves and the instrumentation).     

顺铂诱导的人肺腺癌多药耐药细胞株辐射敏感性的体外研究

对顺铂（Cisplatin，CDDP）诱导的人肺腺癌多药耐药单克隆细胞株SPC—A-1／CDDP-4及其亲代SPC-A-1细胞体外的辐射敏感性进行研究。分别在有氧和乏氧条件下检测SPC-A-1，CDDP-4细胞和SPC-A-1细胞内谷胱甘肽（Glutathione，GSH）的含量，对SPC-A-1／CDDP-4细胞和SPC-A-1细胞体外的辐射敏感性进行研究，观察GSH生物合成抑制剂丁胱亚磺酰亚胺（Buthionine sulfoximine，BSO）对SPC-A-1／CDDP-4细胞和SPC—A-1细胞的辐射增敏作用。实验结果表明：单克隆细胞株SPC—A-1／CDDP-4不仅对化疗药：CDDP、阿霉索（Adriamycin，ADM）、甲氨蝶呤（Methotrexate，MTX）和长春新硷（Vincristine，VCR）具有多药耐药性，而且对^137Csγ射线也具有一定的交叉耐受性；这可能与SPC—A-1／CDDP-4细胞的GSH含量无论是在有氧或乏氧条件下，均高于亲代的SPC-A-1细胞有关；BSO在有氧和乏氧条件下对SPC-A—1/CDDP-4细胞和SPC-A-1细胞均有辐射增敏作用，但是乏氧条件下的辐射增敏作用大于有氧，对SPC-A-1／CDDP-4细胞的辐射增敏作用大于对SPC—A-1细胞的辐射增敏作用。     

血清3,5,3’-三碘甲腺原氨酸酶联免疫分析试剂盒的研制

以辣根过氧化物酶标记链亲合素(SA),T₃抗体包被微孔,T₃生物素化,四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立了3,5,3’-三碘甲腺原氨酸（T₃）生物素-亲合素酶联免疫分析(T₃-BA-EL1SA)方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.2 μg/L,批内、批间变异系数分别为7.1％～8.3％和6.5％～10.5％,回收率为98.1％～107.2％;高浓度T₃血清样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.995 7。本试剂盒操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。     

PL and XPS study of radiation damage created by various slow highly charged heavy ions on GaN epitaxial layers

Photoluminescence (PL) spectrum, in conjunction with X-ray photoelectron spectroscopy (XPS) is used to evaluate the surface damage of GaN layer by highly-charged Xe^q+ (18 ? q ? 30), Ar^q+ (6 ? q ? 16) and Pb^q+ (q = 25,35) ions. The intensity of PL emission of GaN layer, including near band-edge peak and yellow luminescence, decreases with increasing fluence and charge state of the incident ions. Finally the PL emission is completely quenched after irradiation to high fluences at high charge state. A new peak at 450 nm appeared in PL spectra of the specimens irradiated with Xe¹⁸⁺, Ar⁶⁺ and Ar¹¹⁺, indicating that radioactive recombination within donor-acceptor pairs (DAPs) during irradiation. After irradiation, XPS spectra show N deficient or Ga rich on GaN surface and XPS spectra of Ga3d core levels indicate spectral peak evidently shifts from a Ga-N to Ga-Ga and Ga-O bond. The relative content of Ga-N bond decreases and the content of Ga-Ga bond increases with the increase of ion fluence and ion charge state. The binding energy of Ga3d_5/2 electron corresponding to Ga-Ga bond of the irradiated GaN film is found to be smaller than that of metallic Gallium (Ga⁰), which can be attributed to irradiation damage.     

UO_2粉末活性的同时热分析研究

本文介绍了由 ADU 分解还原得来的 UO_2粉末氧化过程的差热(DTA)、热重(TG)同时分析,讨论了热分析结果与成型烧结性、比表面、高价铀化物存在的关系,得出了检验 UO_2粉末的烧结性、高价铀化物存在等判据,为保证 UO_2 粉末及其芯块研制的质量起了重要作用。