壳聚糖季铵盐微球作为注射疫苗佐剂的安全性评价

以小鼠、大鼠、豚鼠、家兔等为动物模型,对壳聚糖季铵盐微球作为注射疫苗佐剂进行安全性评价. 结果表明,小鼠急性毒性实验中50倍临床拟给药剂量(5.0 mg/只)下动物耐受性良好;大鼠重复毒性实验中即使50倍高剂量多次注射微球,动物各组织器官仍无病理性变化;异常毒性实验中小鼠给药后体征正常、体重明显增加,壳聚糖微球注射豚鼠后未见过敏反应及症状;家兔注射部位未发生肌肉组织溃烂、化脓等,佐剂未引起红细胞溶血.     

LT70-DPC结核亚单位疫苗安全性的初步评价

目的初步评价以阳离子脂质体二甲基三十六烷基铵(dimo-thylidioctyl ammonium bro-mide,DDA)、聚肌胞苷酸(Poly I∶C)及胆固醇复合佐剂(简称为DPC)为佐剂的结核融合蛋白ESAT6-Ag85B-MPT64(190-198)-Mtb8.4-Rv2626c(LT70)亚单位疫苗的安全性。方法急性毒性试验:分别将低剂量与高剂量(分别相当于人用剂量的10 000和40 000倍)的LT70-DPC结核亚单位疫苗经皮下、腹腔两种途径免疫小鼠,观察小鼠毒性反应、死亡情况及体重变化等,同时推算小鼠对LT70-DPC亚单位疫苗的最大耐受剂量(maximum tolerated dose,MTD);异常毒性试验:将小鼠和豚鼠分别经腹腔注射LT70-DPC结核亚单位疫苗,观察动物异常反应、死亡情况及体重变化等;全身过敏试验:豚鼠经LT70-DPC结核亚单位疫苗免疫后,经相应疫苗静脉攻击,观察豚鼠过敏反应。结果急性毒性试验:皮下及腹腔注射后14 d内均未见小鼠的异常反应和死亡,体重均增加,小鼠对该疫苗的MTD为:LT70蛋白6 600μg/kg,DDA166 600μg/kg,Poly I∶C33 200μg/kg,胆固醇50 600μg/kg;异常毒性试验:注射后7 d内,小鼠及豚鼠全部健存,均未出现异常症状,体重增加;全身过敏试验:攻击后1 h内,豚鼠均未出现过敏反应。结论 LT70-DPC结核亚单位疫苗具有良好的安全性。     

艾纳香口腔护理液安全性评价研究

选用SD大鼠进行口腔黏膜刺激性试验、口腔及黏膜用药急性毒性试验;选用白色豚鼠进行过敏试验;选用昆明种小鼠进行灌胃给药急性毒性试验,观察给药后动物口腔黏膜、受药皮肤、体重变化、全身毒性反应情况及死亡只数。艾纳香口腔护理液在口腔黏膜刺激性试验中,未发现SD大鼠口腔黏膜组织异常;在过敏试验中,白色豚鼠皮肤用药未引起过敏反应;在急性毒性试验中,大鼠的耐受性良好;小鼠灌胃时测得的最大给药量(MLD)为288 mg/kg,相对于成人给药量的1 200倍。上述动物均未见死亡和明显毒性反应。以上试验说明艾纳香口腔护理液无口腔黏膜刺激性和致敏性,无明显急性毒性反应,提示其作为口腔外用护理液临床用药安全。     

“840”生物杀虫剂的毒性研究

本研究包括对大、小鼠的急性毒性及对家兔的眼刺激试验 ,Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验及小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验。急性经口、经皮试验结果表明“84 0”生物杀虫剂属低毒农药。眼刺激试验结果表明该生物杀虫剂属轻度刺激性农药。Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验及小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验三项试验结果均为阴性 ,表明该生物杀虫剂在试验剂量范围内没有明显的致突变作用。     

生物反应器制备森林脑炎灭活疫苗(Vero细胞)的免疫原性及安全性评价

目的评价生物反应器工艺制备森林脑炎灭活疫苗(Vero细胞)在动物体内的免疫原性及安全性。方法采用生物反应器培养Vero细胞,感染森林脑炎病毒(tick-borne encephalitis virus,TBEV),连续收获,经Sepharose 4FF柱层析纯化后,制备森林脑炎灭活疫苗,免疫昆明小鼠,检测疫苗在动物体内的免疫原性;通过疫苗接种豚鼠主动过敏性试验、ICR小鼠急性毒性试验、新西兰兔局部刺激性试验,评价疫苗在动物体内的安全性。结果制备的森林脑炎灭活疫苗(Vero细胞)对小鼠的免疫保护指数大于5.0×10~5,符合《中国药典》三部(2015版)标准。豚鼠主动过敏试验无豚鼠出现过敏性反应;急性毒性试验ICR小鼠未见明显毒性反应;局部刺激试验新西兰兔注射部位局部大体观察未见明显异常改变。结论生物反应器工艺制备的森林脑炎灭活疫苗(Vero细胞)具有良好的免疫原性和安全性。     

“840”生物杀虫剂的毒性研究

本研究包括对大、小鼠的急性毒性及家兔的眼刺激试验，Ａｍｅｓ试验，小鼠骨髓细胞微核试验及小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验。急性经口、经皮试验结果表明“８４０”生物杀虫剂属低毒农药。眼刺激试验结果表明该生物杀虫剂属轻度刺激性农药。Ａｍｅｓ试验、小鼠骨髓细胞微核试验及小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验三项试验结果均为阴性，表明该生物杀虫剂在试验剂量范围内没有明显的致突变作用。     

新生牛肝活性肽的制备及其毒性检测

目的制备新生牛肝活性肽并评价其安全性。方法采用膜法分离制备新生牛肝活性肽。将3批制品于37～40℃,75%相对湿度条件下存放3个月,以多肽含量为指标观察其稳定性,并进行急性毒性试验、小鼠骨髓细胞微核试验、Ames试验、小鼠精子畸形试验和大鼠喂养试验。结果制备的3批新生牛肝活性肽存放3个月后,多肽含量无明显下降,质量稳定。小鼠和大鼠经口灌人大于20.0g/kg体重的新生牛肝活性肽,均无急性毒性。3种致突变试验均未显示出致突变性,大鼠喂养试验各项指标均未见明显毒性。结论新生牛肝活性肽未表现出明显毒性。     

Benzonase酶降解Vero细胞DNA的狂犬病疫苗动物安全性评价

目的对Benzonase非限制性核酸内切酶降解Vero细胞DNA的狂犬病疫苗进行动物安全性评价。方法依据《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》,对经Benzonase酶处理的冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)进行豚鼠全身主动过敏性试验、体外溶血性试验、大鼠急性毒性试验和家兔肌肉刺激试验,评价疫苗的安全性。结果狂犬病疫苗豚鼠过敏反应发生率为50%,5 min后恢复正常;体外溶血结果为阴性;大鼠急性毒性试验未见异常;家兔肌肉刺激性试验在注射部位肌肉局部出现了极轻度到轻度的间质炎性细胞浸润、肌肉组织变性坏死及间质纤维组织增生,给药后2周,上述病变程度明显缓解。结论利用Benzonase非限制性核酸内切酶降解Vero细胞DNA的狂犬病疫苗(酶残留量低于0.2 ng/ml)安全性良好,不影响其临床使用。     

无毒性逆转的无细胞百日咳菌苗制备

将百日咳菌培养物上清液,经一段硫酸铵盐析提取百日咳主要保护性抗原 FHA 和 PT,用蔗糖密度梯度离心去除内毒素,以戊二醛解毒制成无细胞百日咳菌苗。该菌苗对家兔不产生热原反应,对小鼠毒性低,不引起明显的白细胞增多及组胺致敏活性,小鼠免疫后对百日咳毒菌脑腔攻击具有很好的保护作用,并可产生较高的抗体应答。菌苗经37℃保存3个月未出现毒性逆转现象,质量稳定,为大批量制造质量均一的无细胞百日咳菌苗提供了可能性。     

胶原蛋白维E颗粒毒理安全性试验研究

目的检测胶原蛋白维E颗粒保健食品的安全性。方法根据毒理学实验的基本原则,进行急性毒性实验、遗传毒性试验(包含Ames、小鼠骨髓多染红细胞微核、小鼠睾丸染色体畸变三项实验内容)。结果两种性别的二级昆明种小鼠和二级Wistar大鼠上、下午两次服用胶原蛋白维E颗粒(总量为0.2g/kg.BW),在14天内,大鼠、小鼠无明显中毒症状,动物死亡数为零,按照急性毒性分级标准评价,胶原蛋白维E颗粒无毒性。Ames、小鼠骨髓多染红细胞微核、小鼠睾丸染色体畸变三项遗传毒性试验结果显示为阴性。结论胶原蛋白维E颗粒作为保健食品是安全的。     

Biological evaluation of poly-l-lactic acid composite containing bioactive glass

Biodegradable and biocompatible materials are the basis for medical application. As an initial step for developing bone internal fixation materials, the biological evaluation of poly-l-lactic acid/bioactive glass (PLLA/BG) composite in vitro and in vivo, including the hemolysis test, pyrogen test, acute systemic toxicity test, genetic toxicity test, anaphylaxis test, MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide) test, direct cell culture and in vivo implant experiment, was performed. The results indicated that PLLA/BG composite showed no acute systemic toxicity, genetic toxicity, anaphylaxis reaction, and pyrogen reaction, and the hemolysis ratio was 0.39%. MTT assay indicated that no cytotoxic effect was observed for the PLLA/BG composite, and in addition, a significant increase in cellular activity compared to the negative control group was found. Excellent adhesion between fibroblast and PLLA/BG material was observed, the fibroblasts cultured on the PLLA/BG composite substrates revealed a higher proliferation and differentiation rate than those on the pure PLLA substrates. In vivo implant experiment showed that the PLLA/BG composite could maintain the mechanical properties during the course of fracture therapy, and the malleolar fracture of rabbits was healed in 8 weeks on the whole. Therefore, PLLA/BG composites have a promising biological response as a potential implant material.     

Biological Assessment of Composite Materials Based on Poly-L-lactide and Bovine Bone

Biodegradable polymers and bioactive fillers are being combined in a variety of composite materials for biomedical application. Biological properties in vivo of poly-L-lactide (PLLA) matrix containing bovine bone were investigated by using acute systemic toxicity in vivo, blood biocompatibility, sensitivity, pyrogen, and genetic toxicity testing methods. The results indicated that there were no toxic and death cases observed in the acute systemic toxicity test. The PLLA/bovine bone composite showed no genetic toxicity, pyrogen, or sensitizing response and the hemolytic index was 0.29%. The results from these studies demonstrated that PLLA/bovine bone has a good biocompatibility and good biological safety. Therefore, PLLA/bovine bone composite materials can be promising biomedical materials for bone tissue engineering.     

淀粉糖苷表面活性剂急性毒性实验

按照GB 7919—87对淀粉糖苷表面活性剂进行了小白鼠急性皮肤毒性实验、家兔完整皮肤和破损皮肤急性皮肤刺激实验、多次皮肤刺激实验、一次眼刺激实验、多次性眼刺激实验、皮肤致敏实验。评价了淀粉糖苷表面活性剂对眼睛和皮肤的局部应用安全性。结果表明,C0810、C1200、C1214淀粉糖苷表面活性剂无急性皮肤毒性,无皮肤刺激性,无眼刺激性,致敏率为0,无皮肤致敏反应。淀粉糖苷皮肤局部应用安全可靠。     

短棒状杆菌有效成分的分离及其作用

目的减轻短棒状杆菌全菌体制剂接种后的局部疼痛等副作用。方法采用超声破碎、蛋白水解及脱脂的方法提取了细胞壁,通过脾激活试验及抑瘤试验,检测纯化的短棒状杆菌细胞壁活性对家兔股四头肌的局部刺激作用及热原反应。结果纯化的短棒状杆菌细胞壁可使小鼠脾激活指数达到4.8,能抑制艾氏腹水瘤的生长,生存率达到80%;家兔股四头肌肌肉注射后未见局部充血坏死;家兔热原试验未见明显发热。结论纯化的短棒状杆菌细胞壁不仅保留了全菌体制剂所具有的活性,而且明显减轻了局部的刺激作用。     

Biocompatibility and characteristics of theophylline/carboxymethyl chitosan microspheres for pulmonary drug delivery

The main aim was to evaluate the biocompatibility of theophylline/carboxymethyl chitosan/β‐cyclodextrin microspheres made by spray drying for pulmonary delivery. Haemolysis tests and cell culture experiments were used to determine blood and cell biocompatibility, and in vivo implantation experiments were used to examine tissue biocompatibility. The theophylline/carboxymethyl chitosan/β‐cyclodextrin microspheres were spherical in shape with a smooth or wrinkled surface, and showed no haemolysis activity. The cytotoxicity was dependent on concentration and showed no toxicity at low concentration. The results of implantation indicated that the inflammatory reaction gradually lessened and disappeared and had no significant difference from that of an operative suture. Therefore, theophylline/carboxymethyl chitosan/β‐cyclodextrin microspheres possess good biocompatibility and can be used as a promising carrier for pulmonary drug delivery. © 2013 Society of Chemical Industry     

BCG-CpG-DNA一般毒性的初步评价

目的观察BCG-CpG-DNA对小鼠急性毒性和28d长期毒性作用,评价其一般毒性。方法小鼠分别经背部皮下给予BCG-CpG-DNA100、250和500μg1次(急性毒性试验)和7次(28d长期毒性试验),对照组注射生理盐水。单次给药后观察小鼠的生长情况和体重变化,14d后观察脏器是否发生病变;重复给药期间及末次给药后3周恢复期内,每周观察小鼠外观体征、局部刺激性和体重变化;末次给药后3d及3周检测血液学、血液生化学指标及主要脏器系数和抗双链DNA抗体水平。结果 BCG-CpG-DNA急性毒性试验中,各组小鼠均健康存活,体重增加,无毒性反应。BCG-CpG-DNA28d长期毒性试验中,动物体重、行为活动无异常,给药部位无局部刺激性表现;BCG-CpG-DNA重复给药可提高小鼠免疫细胞的数量;末次给药后3d,各试验组脾脏系数均高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05),经过3周恢复期回复正常;各试验组血清中抗双链DNA水平与对照组比较,差异无统计学意义,均低于25U/ml的临界值。结论 BCG-CpG-DNA主要影响小鼠的免疫细胞和免疫器官,未见其他明显的急性毒性和长期毒性作用,表明BCG-CpG-DNA具有较好的安全性。     

表达狂犬病毒糖蛋白的重组痘苗病毒对啮齿动物接种的反应

狂犬病毒糖蛋白重组痘菌病毒（V－RG）与非重组痘菌病毒比较，V－RG对小白鼠爆发性致死量下降10000LD50；对家兔眼粘膜及皮肤感染后，3～5天内呈现轻微的红、肿，3周内全部消退。所有局部损害仅限于表皮，未见其它不良反应。V－RG经口免疫的动物7天即产生抗体，于第14天能抵抗致死量狂犬病毒脑内或肌肉内攻击。     

Biocompatibility and degradability of alginate-poly-L-arginine microcapsules prepared by high-voltage electrostatic process

To explore biocompatibility and degradability of alginate-poly-l-arginine (APLA) microcapsules prepared by high-voltage electrostatic process, this study investigated cytotoxicity, blood compatibility, acute toxicity, and in vivo biocompatibility and degradability of APLA microcapsules. The results showed that the uniform APLA microcapsules almost had no cytotoxicity within 1.0?mg/mL, and their degradation products promoted cell proliferation. APLA microcapsules had excellent hemocompatibility even at 200?mg/mL, and their extract products did not create acute toxicity even at 5,000?mg/kg. The inflammatory responses induced by APLA microcapsules were moderate and decreased with time, and APLA microcapsules could be degraded and phagocytized by tissue cells.     

抗肝癌基因疫苗内毒素去除方法的建立

目的建立去除抗肝癌基因疫苗pVAX1-aLCGV内毒素的方法。方法采用Triton X-114液相分离法去除抗肝癌基因疫苗中的内毒素,鲎试剂法检测疫苗中的内毒素含量,家兔法复试,ELISA法检测内毒素入血前后血浆中细胞因子TNF-α和IL-8的含量及疫苗的免疫原性,并比较处理前后的基因疫苗转染SMMC-7721和HepG2细胞的转染效率。结果经Triton X-114处理后,基因疫苗的内毒素含量及热原检测均合格;内毒素入血后,血浆中TNF-α和IL-8的含量均明显升高;疫苗的免疫原性与处理前比较,差异无统计学意义;处理后疫苗质粒的细胞转染效率增高。结论 Triton X-114能有效去除基因疫苗pVAX1-aLCGV中的内毒素,为其临床应用奠定了基础。