天马颗粒剂抑制人结肠癌细胞株SW480增殖机制研究

目的:探讨天马颗粒剂抑制人结肠癌细胞株SW480增殖的作用,并对其增殖抑制作用机制进行初步探讨。方法:采用不同质量浓度的天马颗粒剂(10~(-1)g·mL~(-1)、10~(-2)g·mL~(-1)、10~(-3)g·mL~(-1)及10~(-4)g·mL~(-1))处理人结肠癌细胞株SW480,同时设立空白对照组(RPMI 1640培养液处理)及阳性对照组(以5-氟尿嘧啶处理)。观察SW480细胞的形态学动态变化,以MTT法检测各组SW480细胞的增殖情况,另以速率法检测各组SW480细胞中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)比活性的变化情况。建立人结肠癌细胞株SW480免疫抑制小鼠肾包膜下移植瘤模型,同时设立天马颗粒剂组(天马颗粒剂灌胃),空白对照组(生理盐水灌胃)及阳性对照组(5-氟尿嘧啶腹腔注射),8 d后采集肿瘤组织,以免疫组织化学法及图像分析技术定量检测各组移植瘤SW480细胞中Ki-67及PCNA基因的表达情况。结果:随着天马颗粒剂质量浓度的增加,SW480细胞逐渐稀疏,散在生长,细胞变大,透明度差,颗粒增多;当天马颗粒剂质量浓度为10~(-4)g·mL~(-1)时,SW480细胞颜色加深,且部分细胞从瓶壁脱落,甚至部分细胞可见坏死崩解的碎片;实验组10~(-1)g·mL~(-1)、10~(-2)g·mL~(-1)、10~(-3)g·mL~(-1)及10~(-4)g·mL~(-1)的天马颗粒剂均可显著抑制SW480细胞增殖,且随天马颗粒剂作用时间延长及质量浓度增大,SW480活细胞计数逐渐降低(P<0.05);随着质量浓度的增加OD值逐渐降低,增殖抑制率逐渐升高(P<0.05);10~(-1)g·mL~(-1)、10~(-2)g·mL~(-1)、10~(-3)g·mL~(-1)及10~(-4)g·mL~(-1)的天马颗粒剂均会使SW480细胞的AKP比活性升高,且以10~(-2)g·mL~(-1)时的AKP比活性最高,且显著高于其他各组(P<0.05或P<0.01)。阳性对照组AKP比活性与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);Ki-67及PCNA基因主要表达于SW480细胞的细胞核,天马颗粒剂组及阳性对照组Ki-67及PCNA基因阳性着色较空白对照组明显减少,其表达的面积均值及积分光密度均显著降低(P<0.01)。结论:天马颗粒剂可显著抑制人结肠癌细胞株SW480增殖,原因可能与其诱导SW480细胞成熟分化或抑制SW480细胞Ki-67及PCNA基因表达相关。     

藏药湿生扁蕾提取物对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用研究

目的研究藏药湿生扁蕾不同溶剂提取物对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法将54只雄性小鼠随机分为空白组、模型组、联苯双酯对照组、湿生扁蕾水提取物组、湿生扁蕾醇提取物组和湿生扁蕾醇水提取物组6组,每组9只。各组分别灌服生理盐水,联苯双酯溶液,湿生扁蕾水提取物、乙醇提取物、乙醇和水提取物,灌胃7 d后,除空白组外,其余各组均灌服1.5%四氯化碳花生油20 mL/kg造模。24 h后经眼眶静脉丛取血,检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及肝组织中丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,并观察小鼠肝脏病理学改变。结果与空白组比较,模型组小鼠血清ALT,AST活性及肝组织中MDA含量明显升高,肝组织中GSH-Px活性明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,湿生扁蕾不同溶剂提取物组及联苯双酯对照组小鼠血清ALT,AST活性及肝组织中MDA含量明显降低,肝组织中GSH-Px活性明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),其中以湿生扁蕾醇水提取物组作用最为显著(P<0.05)。肝脏病理学观察结果显示,造模后模型组肝损伤程度严重,湿生扁蕾不同溶剂提取物组肝脏病理损伤程度明显减轻。结论藏药湿生扁蕾不同溶剂提取物可减轻四氯化碳诱导的小鼠急性肝损伤,改善小鼠肝功能,作用机制可能与其清除自由基、保护肝细胞膜结构和功能的完整性、提高肝细胞内的GSH-Px活性、增强机体抗氧化能力有关。     

苦参碱对结肠癌SW480细胞凋亡的影响

目的:观察苦参碱对结肠癌SW480细胞凋亡的影响,并分析其作用机制。方法:使用苦参碱对结肠癌SW480细胞进行处理,作为实验组;同时选择空白组作为对照组。采用噻唑蓝比色法检测苦参碱对细胞增殖的作用,Hoechst检测对细胞凋亡的作用,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法检测苦参碱对蛋白表达的影响。结果:培养24 h、48 h、72h后,实验组SW480细胞均出现明显的生长抑制,并随着药物质量浓度的提高和时间的延长而增强。对照组SW480细胞凋亡率为(4.26±0.25)%,明显低于实验组的(9.85±1.03)%、(15.62±1.98)%、(19.69±2.86)%、(26.58±3.58)%、(33.95±5.26)%;SW480细胞经过不同质量浓度的苦参碱作用48 h后出现了明显的细胞凋亡,并且随着质量浓度的提高,细胞凋亡率增加(P<0.05)。与对照组比较,实验组Bcl-2含量降低,Bax含量升高(P<0.05);实验组各组中p-Akt含量均明显降低(P<0.05),总Akt含量无明显变化(P>0.05)。结论:苦参碱能够通过抑制Akt信号通路,抑制SW480细胞生长,并且能够诱导细胞发生凋亡。     

湿生扁蕾中1,7-二羟基-3,8-二甲氧基口山酮对照品的制备

目的研究湿生扁蕾中对照品1,7-二羟基-3,8-二甲氧基口山酮的制备方法。方法湿生扁蕾药材用乙醇提取,从乙醇提取物中分离、制备对照品,采用紫外光谱、红外光谱、质谱和核磁共振谱对其进行结构鉴定。结果所得对照品用归一化法定量,质量分数大于98%。结论该对照品可作为控制湿生扁蕾质量的指标成分。     

CA4P诱导大肠癌细胞死亡机制研究及相关通路检测

为探究康普瑞汀磷酸二钠(CA4P)诱导大肠癌SW480细胞死亡机制及相关通路的检测,体外培养SW480细胞,分别给予不同浓度的CA4P进行刺激。采用CCK-8法测定不同浓度药物对SW480细胞活性的抑制率。采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)测定SW480细胞凋亡率。采用显微镜观察药物作用24、48h后细胞形态。采用Western blotting检测SW480细胞自噬相关蛋白LC3B、Atg7和Beclin-1的表达情况。Path Scan对相关的激活通路进行检测。CCK-8结果显示,药物浓度>50μmol/L时,体外CA4P对大肠癌细胞的抑制率呈递增趋势;FCM检测表明,CA4P作用后,细胞凋亡率无明显变化;显微镜观察在药物作用24h,48h后,SW480细胞的形态发生显著改变。Western blotting结果显示,CA4P刺激SW480使得自噬相关蛋白LC3B、Beclin-1、Atg7表达水平升高,差异具有统计学显著性意义(P<0.05),phospho-p53表达上调。PathScan结果表明,细胞内信号通路Erk1/2、Akt、p53被激活,AMPKα被抑制。CA4P诱导大肠癌细胞死亡可能是通过自噬途径,并且可能与Erk1/2、Akt、p53的上调和AMPKα的下调有关。     

PEITC通过抑制结肠癌细胞PI3K/NF-κB活性而抑制MMP-9表达

目的观察异硫氰酸苯乙酯(PEITC)对结肠癌细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响及其分子机制。方法体外培养结肠癌细胞系SW480,分别用10、30、50μmol/L PEITC作用24 h,划痕愈合实验和侵袭实验分别检测PEITC对SW480细胞迁移与侵袭的影响。RT-PCR检测MMP-9 mRNA的表达;Western blot检测MMP-9蛋白表达和蛋白激酶B(Akt)磷酸化。荧光素酶报告基因分析核转录因子κB(NF-κB)和MMP-9的活性。结果划痕愈合实验和Transwell小室实验结果显示,PEITC能在不影响细胞活性的条件下对SW480细胞侵袭和迁移具有一定抑制作用。同时,Western blot和RT-PCR结果证实PEITC能抑制MMP-9蛋白及mRNA表达。PEITC能抑制Akt磷酸化以及NF-κB的转录活性。PI3K抑制剂LY294002处理后,NF-κB-luc活性以及MMP-9蛋白表达显著降低。此外,不同浓度PEITC处理能显著抑制MMP-9的启动子活性。结论 PEITC是一种潜在的抗结肠癌细胞转移药物,它可能通过影响PI3K/NF-κB通路抑制MMP-9表达而发挥作用。     

应用AG490阻断STAT3对系统性红斑狼疮Th17/Treg平衡的调控研究

目的:研究应用免疫抑制剂AG490阻断信号传导与转录活化因子3(STAT3)对系统性红斑狼疮(SLE)患者辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的调控。方法:选取本院于2018年10月-2019年6月收治的10例SLE(观察组)以及10例体检健康者(对照组),抽取所有受试者外周血约10 mL,采用免疫磁珠法提取CD4+T细胞,并用流式细胞术检测所有受试者Th17/Treg细胞亚群变化。用AG490(0、25、50、100μM)处理患者CD4~+T细胞,检测Th17/Treg细胞亚群以及细胞因子变化,并采用Q-PCR了解STAT3、Foxp3、RORγt水平。结果:观察组患者Th17显著高于对照组,而Treg水平显著低于对照组,两组患者Th17/Treg比较,差异有统计学意义(P<0.05)。随着AG490浓度的增加,Th17/Treg比值、IL-6、IL-17表达水平均逐渐降低,而IL-10、TGF-β水平均显著增加,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。经过不同浓度AG490处理后,STAT3、RORγt mRNA水平以及STAT3蛋白水平均显著降低,其中100μM剂量组蛋白水平显著低于其他三组,而Foxp3 mRNA水平显著增加,各组mRNA水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:通过阻断STAT3信号通路,可诱导Treg分化以及抑制Th17分化,从而调控Th17/Treg平衡,可为系统性红斑狼疮的治疗提供新方向。     

S100A9参与介导具核梭杆菌促结肠癌细胞的增殖与迁移的作用

目的:探讨S100A9在具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn)促结肠癌HCT116和SW480细胞增殖与迁移中的作用。方法:Fn感染HCT116和SW480细胞后,分别采用CCK8实验及Transwell实验检测结肠癌细胞的增殖及迁移能力的变化,采用Real time PCR及Western blot分别检测S100A9基因及蛋白质水平的变化;用S100A9 siRNA转染HCT116和SW480细胞后感染Fn,采用CCK8实验及Transwell实验分别检测两株细胞增殖及迁移能力的变化;利用NF-κB抑制剂BAY 11-7082预处理HCT116和SW480细胞后再感染Fn,采用Real time PCR及Western blot分别检测S100A9基因及蛋白质水平的变化。结果:(1) Fn可促进HCT116和SW480细胞增殖及迁移(P <0.001);(2) Fn感染的HCT116和SW480细胞中S100A9基因及蛋白质水平均较相应对照组明显升高,差异均具有高度显著性(P <0. 01或P <0. 001),即Fn上调S100A9的表达;(3)用S100A9 siRNA下调HCT116和SW480细胞中S100A9表达后,Fn促进这两株细胞增殖及迁移的作用则明显减弱,差异均具有高度显著性(P <0. 001),表明S100A9参与介导Fn的促HCT116和SW480细胞增殖及迁移的作用;(4)在NF-κB通路抑制剂BAY 11-7082预处理的HCT116和SW480细胞组,Fn上调S100A9基因及蛋白质水平的作用明显被逆转,差异均具有高度显著性(P <0. 01或P <0. 001),表明激活NF-κB转录活性是Fn上调S100A9的机制之一。结论:Fn可上调S100A9表达且与NF-κB活化有关,上调S100A9是Fn促结肠癌细胞增殖及迁移的机制之一。     

聚酰胺树脂分离纯化藏药湿生扁蕾总黄酮的工艺研究

目的考察聚酰胺树脂分离纯化藏药湿生扁蕾总黄酮的最佳工艺。方法 70%乙醇回流提取湿生扁蕾,提取液回收乙醇后上聚酰胺树脂柱吸附,用不同体积分数乙醇洗脱,比色法检测洗脱液总黄酮的含量。结果聚酰胺树脂能很好地吸附湿生扁蕾中的总黄酮,70%乙醇洗脱总黄酮的回收率为90.32%。聚酰胺树脂在适当处理后可重复利用,但随着重复利用次数的增加,聚酰胺树脂对黄酮的吸附力不断下降。结论湿生扁蕾提取物经聚酰胺树脂分离纯化能得到较纯的总黄酮,且工艺简便易行,得率高,为工业化生产提供了参考依据。     

复方湿生扁蕾胶囊不同配伍对湿生扁蕾化学成分含量的影响

目的探讨复方湿生扁蕾胶囊组方药物湿生扁蕾与苦豆子不同配伍比例时湿生扁蕾3种化学成分(木犀草素、当药黄素和当药醇苷)的变化及临床的合理应用。方法采用Agilent SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);甲醇和0.04%磷酸水溶液为流动相,在0~20 min内甲醇∶0.04%磷酸水溶液由40∶60~63∶37线性梯度洗脱,在20~50 min内甲醇∶0.04%磷酸水溶液(63∶37)等度洗脱,流速0.8 m L/min,检测波长254 nm,柱温30℃。结果木犀草素在30 min内达到基线分离,回归方程为Y=84 800X+4 540(r=0.999 9),线性范围为0.166~1.664μg;当药黄素在15 min内达到基线分离,回归方程为Y=52 300X-32 300(r=0.999 9),线性范围为0.169~4.240μg;当药醇苷在20 min内达到基线分离,回归方程为Y=102 000X+83 400(r=0.999 9),线性范围为0.179~1.792μg。当湿生扁蕾与苦豆子配伍比例为2 0∶0.9时,符合临床应用安全、有效的原则。结论复方湿生扁蕾胶囊以湿生扁蕾∶苦豆子=20∶0.9的配伍比例符合临床应用安全、有效的原则,为配伍的合理性提供了实验依据。     

住宅楼安装中央空调的加固案例分析

文章通过两处住宅用房安装中央空调的事例,现场查勘、验算与鉴定,证实了在住宅用房的混凝土梁上钻孔洞安装中央空调管线的做法,影响了房屋结构的安全,同时给出了加固处理意见,提出了个人的几点看法.     

测量标志普查资料汇集技术处理

为了适应新的形势发展需要,安徽省国土资源厅已启动新一轮测量标志普查工作。与过去不同,此次普查在资料汇集、调查人员组织、调查资料归档与调用等方面做了较大变革,文章简明阐述了变革后的测量标志普查资料汇集技术处理的过程。     

Regularities of development of settling of models of deep footings

Conclusions 1. The effect of relative penetration on the change in magnitude of settlement is substantial. With the same specific pressure on the base the settlement of the model decreases as the relative penetration increases.2. Published data on values of unit friction forces along lateral surfaces of deep foundations were confirmed. The maximum value of resistance along the side surface was 2 tons/m².3. It was established that the realtionship between the settlement of the model and its diameter is nonlinear. This is of great importance in working out a method for calculating foundations of deep footings from deformations especially if one considers that in this case the foundation carries substantial pressures and deforms under conditions of strongly developed shear regions.Translated from Osnovaniya, Fundamenty i Mekhanika Gruntov, No. 6, pp. 11–12, November–December, 1971.     

西安建筑科技大学城市规划专业硕士研究生学位论文选题分析

本文通过对西安建筑科技大学建筑学院城市规划专业1999-2004年硕士研究生的95篇毕业论文的选题进行整理分析,找出其中的趋势、规律,分析热点问题并试图提出建议。     

巷道围岩塑性区的德鲁克-普拉格准则解

考虑到巷道围岩屈服与中间主应力有关,运用德鲁克-普拉格准则推出了圆形巷道塑性区半径及应力的解析解。结果表明,在考虑中间主应力的情况下巷道围岩塑性区增大,证明中间主应力对塑性区具有一定影响。因此,该理论成果弥补了以往理论未考虑中间主应力的不足,也为巷道围岩塑性区的理论分析提供了一种新的理论计算方法。     

关于运城市区排水的思考

通过了解运城市区的气候特征、地表水含量及排水现状,总结出市区排水工程存在的主要问题,并提出了市区排水工程规划思路,以期建设一个功能齐全、配套完善的市区排水系统,实现市区洪水、雨水、污水的安全有序排放。     

南京郊区化水平评价

在界定郊区和郊区化概念的基础上，主要从工业和人口两方面对南京的郊区化水平做出评价．通过分析，以期能对南京郊区化的发展有一个整体的全新认识，从而有助于新时期南京市的城市规划和管理工作的顺利展开。     

材料性能的随机场特性参数的检定方法

本文建议根据相关函数分析结果描述材料随机场性质，提出用曲线拟合方法检定随机场特性的分析模型参数。经过实例分析，指出指数余弦式模型的现实性及特点。     

自动扶梯逆行故障成因与分析

对自动扶梯突然反转而导致逆行故障的类别和成因进行了分析,讨论了逆行速度及症状,分析了逆行概率及风险,并针对逆行提出了一些对策。