评价平板法定量检测单增李斯特氏菌

目的 评价平板法定量检测单增李斯特氏菌的效果以保障其准确性和灵敏性。方法 选择市场上常用的5种显色培养基和PALCAM琼脂培养基进行试验,根据4789.28-2013对培养基的质量和效果进行评估;依据GB 4789.30-2016进行单增李斯特氏菌平板计数,通过配对t检验法对6种培养基定量结果进行分析,同时比较涂布法和倾注法两种接种方法的差异性。结果 市售的6种培养基半定量测试中,目标菌的生长指数G＞6,非目标菌的生长指数G＜1,质量符合标准检测要求;统计分析显示6种培养基获得的单增李斯特氏菌计数结果无显著差异,但显色培养基的上菌落分布均匀,容易辨认,效果优于PALCAM;同时过分析两种接种方法的检测结果,发现涂布法和倾注法无显著性差异。结论 市售的6种培养基质量符合标准要求,且对单增李斯特氏菌的计数结果具有较好的一致性,涂布法和倾注法两种接种方法具有可交换性。     

金黄色葡萄球菌定性定量检测中显色培养基的效果评价

目的 评估显色培养基对金黄色葡萄球菌定性定量的检测效果。方法 对金黄色葡萄球菌标准菌株、食品样本分离菌株：30株金黄色葡萄球菌、30株其他葡萄球菌,5株常见食源性致病菌分别用金黄色葡萄球菌显色培养基和Baird-Parker培养基进行培养试验,并用国标法和全自动微生物鉴定药敏分析系统对培养结果进行确证鉴定。结果 试验定性结果显示金黄色葡萄球菌在显色培养基上呈紫红色,30株其他葡萄球菌呈蓝色或乳白色,5株常见食源性致病菌其中单核细胞增生李斯特氏菌呈蓝绿色、表皮葡萄球菌呈乳白色、其余3株不生长,可在直观上对几种食品中常见葡萄球菌进行有效区别,而且目标菌在显色培养基和Baird-Parker培养基上计数值无显著差异(P＞0.05),确证结果显示全自动微生物鉴定药敏分析系统结果与GB 4789.10-2016方法结果一致。结论 显色培养基能快速锁定疑似目标菌落,为溯源调查指明方向,定量计数直观有效,配合全自动微生物鉴定药敏分析系统更提高了对目标菌的鉴定效率,更适用于金黄色葡萄球菌定性定量检测。     

2种新方法与国标法检测蜡样芽胞杆菌计数结果的比较研究

目的探寻一种操作简便、结果精确的蜡样芽胞杆菌计数方法。方法选用3种不同方法[分别为国标法、蜡样芽胞杆菌显色培养基法和BACARA(蜡样芽胞杆菌选择性培养基)法]对乳粉中蜡样芽胞杆菌质控样品及标准菌株菌悬液进行定量检验。运用配对t检验法分别比较显色培养基法、BACARA法与国标法检测蜡样芽胞杆菌计数结果一致性。结果 2种新方法与国标法计算检验结果在统计学上并无明显差异(P>0.05),一致性较好。结论 BACARA法具有快速、简便等优点。     

3M PetrifilmTM检测系统对食品中沙门菌检测的评价研究

目的结合不同标准和规范要求,对Petrifilm~(TM)沙门菌测试片(以下简称3M测试片)进行评价。方法用53个血清型的64株沙门菌及30株不同种属的非沙门菌,对3M测试片的包容性和排他性进行评价;针对12类食品样品,通过与我国国标方法的平行检测,对不同沙门菌检测系统的检验效果进行对比分析。结果 64株沙门菌在所测试4种分离培养基上生长率差异有统计学意义(P0.05),4种沙门菌分离培养基对30株非沙门菌抑制效果也存在一定差异。不同沙门菌选择性增菌肉汤-选择性培养基组合可影响食品样品中10~(-1)cfu/25 g染菌水平沙门菌的检出,差异有统计学意义(P0.05),其中以RV(R10)-3M测试片组合检出率最高,而两种选择性增菌肉汤-选择性培养基组合(如国标法)可提高不同种类食品样品中人工污染低浓度沙门菌的检出。结论 3M测试片以其快速、方便、易保存,且准确性与国标方法相当的特点值得在食品微生物检测行业推广。     

以无纺布为载体的菌落总数测试片的研究

本文通过研究菌落总数测试片中无纺布的种类,加工工艺,冷水可溶性凝胶与培养基配比及质构特性,应用于需氧菌计数测试片,对其检测性能进行评价。对菌落总数测试片中冷水可溶性凝胶与培养基在不同比例配比情况下质构特性进行测定,当凝胶与培养基比例为3:7时,硬度、脆性、粘着性、弹性、内聚性、胶着性、回弹性与1%琼脂培养基无显著性差异,并选取60 g/m~2的水刺无纺布为载体,采用浸入培养基加入方式,菌落生长情况良好,清晰可见,菌落计数方便。基于本研究以无纺布为载体测定5种试验菌株的菌落总数并与国标需氧菌平板计数法比较,可达到相同水平的检测限2 CFU/mL和灵敏度(100%);准确度较高,线性相关系数R~2达到0.996。水刺无纺布可作为菌落总数测试片的良好载体。     

食品中双歧杆菌快速检测方法的建立

越来越多的双歧杆菌被添加到食品和保健品中,因此双歧杆菌定量检测对食品或保健品的质量控制和监测显得尤为重要。通过试验,我们发现一种双歧杆菌显色培养基,使双歧杆菌能够生长良好,并显蓝色,对保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、沙门氏菌、大肠埃氏菌和金黄色葡萄球菌均有一定的抑制作用,或显白色,从而准确、有效在显色平板上区分开来。结果表明:双歧杆菌使用该显色培养基在36℃培养48 h就可以直接计数,显色清楚,结果易于观察,检测成本明显低于国标的检测方法;该显色培养基具有较高的特异性,通过对200份自然样品的检测评价,试验所建立的方法与国标方法准确性比较,差异无显著性(F=3.794 6,p0.05)。     

乳杆菌计数测试片凝胶特性与显色特性的研究

本研究以GB 4789.35-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》中的MRS培养基为基础培养基,通过对乳杆菌计数测试片凝胶特性和显色特性研究,研制操作简便、显色清晰、结果准确的乳杆菌计数测试片,对乳中乳杆菌进行计数检验。结果表明:本研究主要对乳杆菌计数测试片的凝胶组成及显色成分进行研究,确定凝胶组成:瓜尔胶、结冷胶、聚丙烯酸钠、卡拉胶4种复配冷水可溶性凝胶,最优凝胶特性为凝胶速度0.5 s,吸水率151.52 mL/g,保水率89.22 mL/g,浊度81%。显色成分为显色剂2,3,5-氯化三苯基四氮唑,添加量为0.08 g/L。乳杆菌计数测试片法与国标方法比较,准确率达到99%,其最低检测限达3 CFU/mL。     

金黄色葡萄球菌定量检测中四种培养基的比较

使用Baird-Parker平板、RPF平板、金黄色葡萄球菌显色培养基平板及3M PerifilmTM金黄色葡萄球菌测试片对金黄色葡萄球菌检测,浓度范围在103~104 CFU/m L,3M测试片、金黄色葡萄球菌显色培养基、RPF平板与BP平板结果相当。在实际检测中,选择适当的培养基辅助检测,结果更加准确可靠。     

不同存放条件的保鲜膜预防冰箱冷藏食物细菌污染的效果比较

目的 研究不同存放条件下的保鲜膜对预防冰箱冷藏食物细菌污染的效果。方法 取9个培养基平板, 分成3组, 每组敞口、覆盖盒装保鲜膜、覆盖非盒装保鲜膜各1个, 放置在冰箱冷藏室, 3组分别在24、48、72 h后取出, 进行细菌培养计数。同时对2种保鲜膜表面细菌培养计数。所有实验进行3次, 计算平均值。结果 2种保鲜膜表面采样后均有细菌生长, 但培养菌落数无显著性差异(P>0.05); 敞口培养基平板均有细菌生长, 与其他培养基平板有显著性差异(P<0.05); 2种保鲜膜覆盖下的培养基平板细菌培养计数均为0, 无显著性差异(P>0.05)。在冰箱不同位置放置的敞口培养基平板表面生长的菌落数无显著性差异(P>0.05)。结论 冰箱冷藏条件下, 不同存放条件的保鲜膜均可达到预防食物空气污染效果。     

单增李斯特菌国标检验培养基质量的比较

通过考察市售单增李斯特菌国标检验培养基对单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes,LM,以下简称单增李斯特菌)和非单增李斯特菌的增菌检测效果,比较不同品牌培养基的质量。该研究采用螺旋涂布计数法,定量测定30株单增李斯特菌和9株非单增李斯特菌在4个品牌的李氏增菌肉汤(LB₁、LB₂)和6个品牌的PALCAM琼脂培养基、李斯特氏菌显色培养基中的生长情况。实验结果表明:30株单增李斯特菌在4个品牌的LB;增菌肉汤中的浓度均值为2.04×10⁷CFU/m L~4.59×10⁷CFU/m L;在LB;增菌肉汤中的浓度为2.36×10⁷CFU/m L~2.69×10⁷CFU/m L;在D品牌的PALCAM琼脂培养基中的生长率均值为0.55,在其余5个品牌的PALCAM琼脂培养基和6个品牌的李斯特氏菌显色培养基中的生长率均值均超过0.85。30株单增李斯特菌在李氏增菌肉汤(LB₁、LB₂)、PALCAM琼脂培养基、李斯特氏菌显色培养基中的增菌检测效果存在显著性差异(p<0.05)。4个品牌的李氏增菌肉汤的增菌效果和6个品牌PALCAM琼脂培养基、李斯特氏显色培养基的检测效果存在显著性差异(p<0.01)。该研究结果表明市售单增李斯特菌国标检验培养基质量差异大。