金黄色葡萄球菌便携式计数测试片的研制

为了研制新型便携式计数测试片检测食品中金黄色葡萄球菌,本文通过正交试验对金黄色葡萄球菌测试片中培养基成份进行优化;研究冷水可溶性凝胶的复配比例,以及优化后的表面活性剂对复配凝胶质构特性的影响。结果表明,金黄色葡萄球菌测试片中培养基组分为胰蛋白胨10 g/L,牛肉膏5 g/L,酵母膏1 g/L,甘氨酸12 g/L,氯化锂5 g/L,尿素0.2 g/L,亚碲酸钾10 mg/L,卵黄粉6 g/L,表面活性剂最优添加量为D-甘露醇4 g/L,丙酮酸钠5 g/L;冷水可溶性凝胶复配比例为瓜尔胶:聚丙烯酸钠=7:3;添加优化后的D-甘露醇和丙酮酸钠的复合冷水可溶性凝胶可获得最优的凝胶质构,其硬度和黏性分别为1362.04 g和630.41 g。将本研究的测试片与国标平板计数方法相比,其检测结果相关性良好(R^2=0.995),可达到相同水平的检出限2CFU/m L和灵敏度(100%)。本文研究的金黄色葡萄球菌测试片可应用于食品中金黄色葡萄球菌的定量检测。     

凝胶型菌落总数测试片的研制

本文以脑心浸液（BHI）肉汤为营养组分,以黄原胶与卡拉胶两种冷水可溶凝胶作为复合凝胶,研制出可应用于食品微生物菌落总数检测的凝胶型测试片。通过正交试验确定测试片培养基附加组分最优添加组合,并试验了两种凝胶不同复配比例对理化及微生物结果的影响,最终确定测试片培养基组分为BHI 38.5 g/L,TTC 0.008 g/L,SAP 0.05 g/L,丙酮酸钠2.0 g/L,且黄原胶与卡拉胶比例为8:2时,测试片达到最优性能。本文研制的菌落总数测试片,与国标平板计数方法相比,两种方法线性相关性达到0.99以上,测试片检出限可达2 CFU/mL,灵敏度达到100%;与行业主流产品3M Petrifilm菌落总数测试片相比,定量结果无明显差异,R2达到0.99。本文所研制的凝胶型菌落总数测试片可应用于食品中菌落总数的检测。     

菌落总数测试卡用凝胶培养基和显色剂的优化

筛选适宜的冷水溶解凝胶,优化凝胶培养基成分和显色剂浓度,制备菌落总数测试卡并与倾注培养法进行菌落总数检测比较。结果显示:卡拉胶和CMC以2∶1的质量比混合、复合凝胶粉和培养基粉以2∶1的质量比混合、TTC实际浓度为0.025mg/mL时,制备的菌落总数测试卡具有较好的检测效果,与倾注法比较无显著差异。说明该方案优化的凝胶与显色剂配方可用于制备菌落总数测试卡。     

乳杆菌计数测试片凝胶特性与显色特性的研究

本研究以GB 4789.35-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》中的MRS培养基为基础培养基,通过对乳杆菌计数测试片凝胶特性和显色特性研究,研制操作简便、显色清晰、结果准确的乳杆菌计数测试片,对乳中乳杆菌进行计数检验。结果表明:本研究主要对乳杆菌计数测试片的凝胶组成及显色成分进行研究,确定凝胶组成:瓜尔胶、结冷胶、聚丙烯酸钠、卡拉胶4种复配冷水可溶性凝胶,最优凝胶特性为凝胶速度0.5 s,吸水率151.52 mL/g,保水率89.22 mL/g,浊度81%。显色成分为显色剂2,3,5-氯化三苯基四氮唑,添加量为0.08 g/L。乳杆菌计数测试片法与国标方法比较,准确率达到99%,其最低检测限达3 CFU/mL。     

3M检测纸片与国标方法相关性实验观察

<正>传统的微生物学检测方法是概率理论与实验设计方法在细菌测定上的实际应用,被定为国标法;3M公司生产的细菌总数及大肠菌群检测纸片,含有VRB(VioletRedBile),一种冷水可溶性的凝胶剂和四唑翁(tetrazolium)指示剂,可增强菌落计数效果,其表面覆盖的胶膜,可留住发酵乳糖的大肠菌群产生的气体。     

3种不同培养基和1种测试片检测水溶性化妆品中菌落总数的结果分析

目的使用t检验法分析3种不同培养基和1种测试片检测水溶性化妆品中菌落总数结果。方法参照《化妆品安全技术规范》(2015年版),使用卵磷脂吐温80营养琼脂、TTC营养琼脂、平板计数琼脂方法进行样品菌落总数检测,然后使用Petrifilm TM菌落测试片检测样品。运用配对t检验法评价4种不同方法对水溶性化妆品中菌落总数计数结果一致性的影响。结果在10~2、10~3 CFU/m L 2种不同浓度,平板计数琼脂法结果波动性最大,无法抑制菌落蔓延,而TTC营养琼脂和菌落测试片相对卵磷脂吐温80营养琼脂,具有抑制菌落蔓延生长、提高计数结果准确性的作用。结论在一定浓度下,可根据实际情况来选择相应培养基检测水溶性化妆品中菌落总数以提高检测效率和质量。     

食品安全国家标准中菌落总数测定方法影响因素分析

目的 对GB 4789.2-2016菌落总数测定方法的重要影响因素进行了系统分析。方法 使用大肠埃希氏菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC6538和枯草芽孢杆菌ATCC6633的新鲜菌株和冻干样品评价PCA培养基的倾注温度(45 ℃和50 ℃)、已处理样品放置时间(0~90 min)、培养基倾注体积(12~20 mL)、培养基品牌(7种, 编号A-G)的差异对菌落总数计数结果的影响。结果 已处理样品放置90 min后, 菌落总数的计数结果显著性低于放置0 min(P=0.023)和15 min(P=0.021)样品的计数结果; 使用品牌B培养基得到的菌落计数结果显著性低于使用品牌F培养基得到的结果(P=0.024)。PCA培养基倾注温度(45 ℃和50 ℃)和倾注体积(12~ 20 mL)对菌落总数计数结果的影响未见显著性(P>0.05)。结论 需细化国标菌落总数测定方法检验流程, 研发并引入可靠的参比培养基, 对检验过程予以高度规范化, 以保障检验数据稳定、可靠。     

冷藏大口黑鲈鱼片品质变化规律及优势腐败菌致腐能力分析

本研究的目的为分析大口黑鲈鱼片冷藏过程中品质的变化规律和确定贮藏过程中的优势腐败菌及其致腐能力。以新鲜鲈鱼为原料,通过测定鲈鱼肉的质构特性、菌落总数、挥发性盐基氮(Total volatile basic nitrogen, TVB-N)和K值等指标,对冷藏过程中鱼片的品质和优势腐败菌及其致腐能力进行了分析,并通过16S rRNA序列鉴定分析各腐败菌的种属。质构特性、菌落总数、TVB-N 总挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen, TVB-N)、K值等品质相关指标的测定结果表明,随着贮藏时间的延长,鱼片的弹力、咀嚼性和胶着性均呈缓慢下降的趋势;菌落总数逐渐增长;TVB-N在贮藏前7 d变化不大,在第7 d后急速上升;K值在第7 d时超过了60%,达到了初期腐败。采用选择性培养基获得鲈鱼腐败期的特定菌落,结合菌落形态观察、16S rDNA与革兰氏染色技术,确定所属菌株属种,并评价各菌株的致腐能力。筛选出T2、C1和C2 三3株菌为4℃贮藏鲈鱼片的疑似优势腐败菌。16S rDNA鉴定这3株菌分别为希瓦氏菌、假单胞菌和普罗维登斯菌。根据接种这3三株腐败菌的大口黑鲈鱼片的TVB-N产量因子(YTVB-N/cfu)的评价结果,确定这三3株菌的致腐能力为假单胞菌>希瓦氏菌>普罗维登斯菌。假单胞菌为4℃贮藏的鲈鱼片腐败的优势菌。     

护手霜中菌落总数测定用培养基的探讨

检测化妆品菌落总数时,为使菌落在培养基中清晰可辨,允许在卵磷脂、吐温80一营养琼脂培养基中添加2,3,5-三苯基氯化四氮唑(以下简称TTC)。文章以护手霜为样品基质,分别加入适当菌含量的大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、酵母工作菌悬液,制备5mg/100mL浓度的TTC卵磷脂、吐温80-营养琼脂,同时以不添加TTC卵磷脂、吐温80一营养琼脂平板进行验证,以营养琼脂培养基作为对照,对菌落计数结果进行对比。结论:添加了5mg/100mLTTC的培养基用于化妆品菌落总数检测时对G+有明显的抑制作用,建议在日常检测过程中需慎重选择。     

冰鲜鸡预冷过程中微生物菌群多样性动态分析

为了对肉鸡屠宰预冷过程中预冷水、鸡胴体的微生物群落结构进行动态分析,研究二者优势菌群的消长规律。本文对第一批屠宰鸡通过预冷水0、2、4、6、8 h时预冷池中一阶、二阶预冷水以及鸡胴体进行菌落总数(TVC)检测,然后采用高通量测序的方法对二者的群落结构进行动态分析。菌落总数测定结果表明:在预冷过程中,一阶预冷水菌落总数由103 CFU/mL增长到105 CFU/mL,二阶预冷水菌落总数由102 CFU/mL增长到104 CFU/mL,在预冷前,鸡胴体的菌落总数为4.53 lg CFU/g,经预冷后在6~8 h内,鸡胴体表面菌落总数高于预冷前,说明预冷水已经失去了清洗减菌的作用,还可能会对鸡胴体造成交叉污染。高通量测序发现:在预冷过程中,一阶预冷水中气单胞菌属减少,假单胞菌属、链球菌属增加;二阶预冷水的不动杆菌属减少,假单胞菌属增加;与预冷前相比,预冷过程中鸡胴体的魏斯氏菌和漫球菌属减少,金黄杆菌属和假单胞菌属增加。本研究表明预冷后期预冷水失去减菌作用,对鸡胴体造成污染,预冷工艺主要对气单胞菌属、魏斯氏菌和漫球菌属有较好的减菌效果,对金黄杆菌和假单胞菌属减菌效果不佳。这为宰后胴体预冷工艺的优化提供参考依据,同时为冰鲜鸡产品的质量安全提供保障。     

婴幼儿米粉中菌落总数检测方法的比较

目的 比较5种不同方法检测婴幼儿米粉中菌落总数的检测效果, 确定最优的检测方法。方法 采用PCA直接倾注法、添加2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride, TTC)方法、无菌滤网过滤基质方法、倾注后覆盖法、试纸片法分别测定10种婴幼儿米粉中的菌落总数。结果 5种方法检出率顺序为倾注后覆盖法＜PCA直接倾注法＜添加TTC法、试纸片法＜无菌滤网过滤法。倾注后覆盖法较PCA直接倾注法能有效地抑制容易蔓延生长的需氧细菌, 但两者受米粉基质的影响较大。添加TTC法能降低米粉基质对计数结果的干扰, 采用试纸片法能减少米粉基质和米片对计数的影响, 但两者都抑制平板中部分革兰氏阳性菌的生长, 导致计数结果偏低。采用无菌滤网过滤法能有效地消除米粉基质与米片的干扰, 且不受TTC对菌落的抑制因素影响。结论 在对婴幼儿米粉的菌落总数检测中, 无菌滤网过滤法优于其他4种方法。     

水针板清洗技术的研究

为寻找一种新型高效的水针板清洗方法,用物理清洗和化学清洗2种方法对水针板样品进行清洗,比较2种方法的清洗效果,分析不同方法对非织造布产品性能的影响,发现利用含有乙二胺四乙酸(EDTA)成分的化学清洗剂对水针板进行清洗,能取得良好的清洗效果,满足实际生产的要求。     

Study of woven and non-woven fabric on water retention property for effective curing of concrete

The article reveals the development and analysis of fabric structure for its water absorption and retentivity property for concrete curing. The presence of moisture in concrete and curing time are influencing factor for concrete strength. Different fabric structures (woven and non-woven) of various densities are developed and analyzed for the water retentivity and drying rate at different condition of test. The non-woven structure has shown more retentivity than woven structure under different conditions of test. Analysis carried on the implication of water retentivity of fabric on compressive strength of concrete. The results reveal, the water absorption and retentivity are superior for non-woven compared to woven of same fabric density by its three-dimensional structure and space ratio. The concrete strength, cured with non-woven is 2.15 N/mm² and it is higher than the woven of same fabric density of 370 GSM. The concrete cured with fabric density of 700 GSM and 750 GSM of non-woven have shown the maximum compressive strength of 19.95 N/mm² and 20.05 N/mm² respectively, almost nearing the result 20.1 N/mm² of concrete fully immersed in water. It is suggested that non-woven of fabric density 750 GSM is optimum for curing and to attain the maximum concrete strength.     

ATP荧光检测法快速筛查冷荤间加工现场凉拌菜的细菌污染状况

探讨ATP(adenosine triphosphate,三磷酸腺苷)荧光检测法检测冷荤间加工食品细菌总数的可行性,为食品细菌污染现场快速检测提供科学依据。方法 从本市餐饮单位中随机抽取20家各类餐饮单位,采集4大类80份菜品作为冷荤间加工食品检测样品,分别应用ATP荧光检测法与实验室平板计数法检测细菌总数。结果 ATP荧光检测法所得菌落数与实验室平板计数法检测菌落总数对比,假阳性率18.8%,假阴性率20.4%。结论 ATP荧光检测法适用于冷荤间加工食品微生物的快速检测。     

培养条件对奇异变形杆菌生物膜生长的影响

采用改良微孔板培养,结晶紫染色、平板计数以及电镜扫描方法研究不同初始菌浓度、培养环境(温度、气体环境)、培养基成分(pH、氯化钠浓度、碳源种类和浓度),培养基用量及接触材料对奇异变形杆菌(Proteus mirabilis,P. mirabilis)生物膜生长的影响。经过24 h培养,初始菌浓度10 CFU/cm2时,生物膜形成量较低,初始菌浓度102~108 CFU/cm2时,生物膜形成量明显;37 ℃有氧条件适宜P. mirabilis生物膜形成;培养基组成(2.0% NaCl,1.0%麦芽糖,pH8.0)和加倍用量对P. mirabilis生物膜形成具有明显的促进作用;粗糙的木制表面最易使P. mirabilis粘附并形成生物膜,硅胶次之,聚丙烯塑料和盖玻片表面比较光滑,菌体不易粘附,生物膜难以形成;不同接触材料形成的P. mirabilis生物膜结构和形态不同,硅胶上生物膜为蘑菇状,盖玻片上生物膜成扁平状。本文研究结果可为食品生产加工过程中P. mirabilis污染防控提供理论依据和技术支撑。     

医用防护服织物的结构与透湿量

采用扫描电子显微镜观察了医用防护服织物的结构,分析了不同复合结构的特征,分别用吸湿法和蒸发法测试了医用防护服织物的透湿量,以及模拟穿着多层织物的状态时医用防护服织物的透湿量。结果表明,聚四氟乙烯(PTFE)膜层压织物透湿量高,聚氨酯(PU)涂层织物及热塑性聚氨酯(TPU)涂层非织造布透湿量低,且有明显的涂层缺陷,有剥落现象。试样蒸发法透湿量普遍较吸湿法透湿量小,且试样间透湿量差异小。随层数的增加,多层织物组合试样透湿性有所下降。     

Evaluation of dry sheet medium culture plate (Compactdry TC) method for determining numbers of bacteria in food samples

The Compactdry, a ready-to-use and self-diffusible dry medium sheet culture system, has been developed by the Nissui Pharmaceutical Co. Ltd. for enumerating bacteria in food. The Compactdry consists of special spread sheet with culture medium that is the same as standard method nutrients, a cold water-soluble gelling agent, and a unique plastic dish. The procedure for bacterial examination in a sample solution (1 ml) is to just inoculate a test solution into the center of the self-diffusible medium and incubate at 35 degrees C for 48 h. The Compactdry TC (CTC) for the enumeration of total aerobic bacteria from 97 food samples was compared with the standard plate count (SPC) method and 3M Petrifilm aerobic count plates (PAC). The correlation coefficients between the CTC and SPC method, the CTC and PAC, and the PAC and SPC method were 0.97, 0.99, and 0.97, respectively. The Compactdry system is useful for the enumeration of total aerobic bacteria in food and may be a possible suitable alternative to the conventional pour-plate or the Petrifilm plate methods.     

螺旋平板法在菌悬液计数及食品和化妆品菌落总数检测中的应用

应用螺旋平板法和国标方法分别对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌的培养菌悬液以及食品、化妆品样品161份进行菌落总数检测,国标法培养48h后进行手工计数,螺旋平板法自动接种培养48h后进行仪器自动计数,将两种方法结果进行比较,结果无显著性差异(P＞0.05)。因此螺旋平板法适用于菌悬液计数及食品和化妆品菌落总数的测定。