鹿茸多肽对IL-1β诱导的大鼠软骨终板细胞增殖和CollagenⅠ、CollagenⅡ、IL-6 mRNA表达的影响

目的:观察不同浓度的鹿茸多肽对IL~(-1)β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞增殖和Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen,CollagenⅠ)、CollagenⅡ、白细胞介素(interleukin-6,IL-6) mRNA表达的影响。方法:选取健康SD大鼠(1个月龄),取其脊柱椎间盘软骨终板细胞,并培养至第3代软骨终板细胞进行实验。空白对照组不做任何处理,诱导组只加入10μg·L~(-1)的IL~(-1)β,给药组在培养基中加入10μg·L~(-1)的IL~(-1)β和不同质量浓度的鹿茸多肽(分别为10 mg·L~(-1)、30 mg·L~(-1)、50 mg·L~(-1))。用MTT比色法检测3个时间点(24 h、48 h、72 h)各组椎间盘软骨终板细胞的增殖情况; qP CR法检测CollagenⅠ、CollagenⅡ及IL-6 mRNA的表达。结果:MTT法检测结果:鹿茸多肽10 mg·L~(-1)组的软骨终板细胞增殖与诱导组比较,差异无统计学意义(P> 0. 05);鹿茸多肽30 mg·L~(-1)组和鹿茸多肽50 mg·L~(-1)组能促进软骨终板细胞的增殖,与诱导组比较,差异有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01)。qP CR检测结果:IL~(-1)β诱导组的CollagenⅡmRNA的表达降低,CollagenⅠ、CollagenⅡ、IL-6的mRNA的表达升高,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P <0. 05);不同质量浓度的鹿茸多肽均能增强CollagenⅡmRNA的表达,降低CollagenⅠ和IL-6 mRNA的表达,差异均有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01),30 mg·L~(-1)、50 mg·L~(-1)鹿茸多肽效果更加显著(P <0. 01)。结论:一定浓度的鹿茸多肽能减轻IL~(-1)β对软骨终板细胞增殖的抑制,升高CollagenⅡmRNA的表达,降低CollaoenⅠ、IL-6 mRNA的表达,从而延缓椎间盘的退变。     

miR-148a / b 真核表达质粒的构建及其在胰腺癌细胞系中的表达简

目的构建miR-148a／b真核表达质粒,转染胰腺癌AsPC-1细胞,并观察其miR-148a／b的表达水平。方法根据miRBase提供的序列合成miR-148a／b前体,PCR扩增后形成双链,插入线性化真核表达质粒pcDNA3．1,构建pcDNA3．1／miR-148a／b,进行酶切和测序鉴定。将胰腺癌AsPC-1细胞分4组进行质粒转染：转染pcDNA3．1／miR-148a（miR-148a组）、转染pcDNA3．1／miR-148b（miR-148b组）、转染pcDNA3．1（空质粒对照组）和仅加脂质体（空白对照组）。转染48h后,采用定量PCR法检测各组细胞中miR-148a／b的表达量。结果pcDNA3．1／miR-148a／b的酶切和测序与miRBase提供的序列完全一致。转染48h后,miR-148a组AsPC-1细胞中的miR-148a表达量明显高于空质粒对照组和空白对照组（6．76±0．35比1．00±0．54、1．02±0．40,均P〈0．05）,miR-148b组AsPCq细胞中的miR-148b表达量明显高于空质粒对照组和空白对照组（3．28±0．08比1．02±0．35、1．01±0．28,均P〈0．05）。结论成功构建了miR-148a／b真核表达质粒pcDNA3．1／miR-148a／b,该质粒能显著上调胰腺癌AsPC-1细胞的miR-148a／b表达水平。     

乳腺癌外周血微转移与微血管密度相关性研究及临床意义

目的：研究乳腺癌外周血微转移与相应肿瘤组织微血管生成的关系,并探讨其临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法,对50例乳腺癌（乳癌组）及30例乳腺良性肿瘤患者（对照组）外周血中乳腺上皮黏蛋白（small breast epithelial mucin,SBEM）表达情况进行检测;采用免疫组织化学法,用 CD105标记肿瘤新生血管,计数乳腺癌和乳腺良性肿瘤组织微血管密度（MVD）;分析其相关性及与临床病理特征之间的关系。结果乳癌组 SBEM的阳性表达率为36％（18/50）,高于对照组的0．0％（0/30）（P＜0．05）;乳癌组 MVD 值为24．56±4．12,高于对照组的8．61±2．87（P＜0．05）;乳癌组 SBEM表达与 MVD计数呈正相关（r＝0．712,P＜0．05）,与TNM分期、淋巴结转移密切相关（P＜0．05）;乳癌组 MVD计数与肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期有关（P＜0．05）。结论乳腺癌外周血微转移与相应癌组织微血管密度密切相关,MVD较高者更易发生外周血微转移,并与肿瘤的发生、发展和转移有关。     

IL-15在兔膝创伤性关节炎模型中的表达研究

目的观察兔膝创伤性关节炎早期白介素15（IL-15）炎性因子的表达及其变化,以进一步探讨创伤性关节炎的发生机制。方法将48只健康新西兰大白兔随机分为实验组和对照组,每组24只。实验组行左后膝关节前后交叉韧带切断和内侧半月板切除术;对照组行单侧膝关节切开术作为假手术对照。2组分别在术后6、12、24h,1、2、3、4周7个时间点抽取关节液,采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定关节液中IL-15含量表达。组织学观察其关节软骨和滑膜的变化。结果48只大白兔中进入结果分析29只。2组术后6h兔膝关节液中IL-15含量较其他时间点明显增高（P〈0．05）;术后1周IL-15表达较术后24h明显降低（P〈0．05）;术后1、2、3、4周4个时间点的IL-15表达成升高趋势;实验组术后各时间点IL-15含量均高于对照组（均P〈0．05）。实验组术后4周,关节软骨失去原有的光泽,呈灰黄色,有裂纹,HE染色见表层略不平整,有小裂隙,纤维组织增生,玻璃样变性,局灶性软骨基质异染性减弱,软骨细胞减少,软骨基质纤维化。结论创伤后兔膝创伤性关节炎早期IL-15高表达,关节软骨及滑膜退变,创伤性关节炎早期与IL-15关系密切。     

温胆汤治疗肿瘤相关胃肠道反应的机制研究

目的：观察温胆汤对荷瘤小鼠的胃肠道5-羟色胺和嗜铬细胞分泌的影响。方法皮下注射 Colon-26腺瘤建立小鼠荷瘤模型。将32只小鼠随机分为温胆汤组和荷瘤对照组。在第7、14天用高效液相色谱法测定小肠中5-羟色胺的含量,用免疫组化法检测嗜铬细胞的密度。并观察每组小鼠的摄食量。结果正常小鼠第1周和第2周小肠的5-羟色胺含量分别为（1．57±0．09）μg·g-1和（1．54±0．11）μg·g-1,而接种肿瘤细胞后的小鼠分别为（2．93±0．17）μg·g-1和（3．99±0．32）μg·g-1,显著高于正常小鼠。而温胆汤组则分别降到（2．03±0．17）μg· g-1和（3．05±0．17）μg·g-1,显著低于荷瘤对照组,2组比较差异有统计学意义（P＜0．01）。免疫组化显示小肠中嗜铬细胞在肿瘤细胞移植后的第1周和第2周显著增加,而服用温胆汤的小鼠小肠嗜铬细胞数量明显降低,2组比较差异有统计学意义（P＜0．01）。在第14天,荷瘤组小鼠和温胆汤组小鼠的平均食量分别为（0．70±0．12）g和（1．12±0．04）g,2组比较差异有统计学意义（P＜0．01）。结论温胆汤可以通过减少肿瘤患者肠道嗜铬细胞数量和5-羟色胺含量而减轻肿瘤相关胃肠道反应。     

腰椎间盘突出症患者突出椎间盘与相邻椎间盘退变程度的MRI探究

目的:研究腰椎间盘突出症患者其突出椎间盘、相邻椎间盘发生退变的MRI。方法:选择2014年1月-2018年12月本院收治的86例腰椎间盘突出症患者。突出椎间盘产生在L_(4～5)节段中共43处,在其相邻椎间盘中共86处;在L_5～S_1节段中共43处,在其相邻椎间盘中共43处。监测开展手术以前的腰椎部位MRI,椎间盘运用Pfirrmann分级标准加以评定,软骨终板形态运用Pappou分级标准加以评定,观察比较其结果。结果:各年龄段中L_(4～5)、L_5～S_1突出椎间盘,其Pfirrmann分级均多于Ⅲ级,其Pappou分级均多于Ⅱ级(P<0.05);各年龄段中软骨终板退变结果加以比较,差异无统计学意义(P>0.05)。各年龄段中,突出椎间盘产生在L_(4～5)、L_5～S_1中处于上位的相邻椎间盘,其Pfirrmann分级加以比较差异有统计学意义(P<0.05),处于下位的相邻椎间盘,其Pfirrmann分级加以比较差异无统计学意义(P>0.05),在相邻椎间盘中,其软骨终板退变结果加以比较差异无统计学意义(P>0.05)。在L4～5突出椎间盘中的L3～4相邻椎间盘中,其Pfirrmann分级、软骨终板形态的Pappou分级评分均大于L_5～S_1的相邻椎间盘(P<0.05)。结论:对腰椎间盘突出症患者而言,在其突出节段中,相邻椎间盘、软骨终板所产生的退变同突出椎间盘退变程度、年龄间紧密联结,且处于上位的相邻椎间盘产生的退变多于下位。     

血清可溶性 Fas 及 FasL 水平与膀胱癌病理特征的关系

目的：探讨血清可溶性 Fas（sFas）及 FasL（sFasL）含量变化与膀胱癌病理特征的关系,以确定血清 sFas 及sFasL 含量检测在临床上的应用价值。方法采用酶联免疫吸附试验（Elisa）定量检测78例膀胱癌患者（膀胱癌组,浅表性膀胱癌54例,浸润性膀胱癌24例;G1期20例,G2期39例,G3期19例）术前、术后和30例健康体检者（对照组）血清中 sFas 和 sFasL 的水平。观察血清 sFas 和 sFasL 含量的变化与膀胱癌病理特征的关系。结果膀胱癌组术前血清中 sFas 和 sFasL 含量分别为（18．53±1．74）、（13．46±1．57）μg·L－1,明显高于术后及对照组[（7．03±1．54）、（4．38±1．23）μg·L－1及（5．98±1．36）、（3．42±1．03）μg·L－1]（均 P ＜0．05）。膀胱癌组术后血清 sFas 和 sFasL 含量与对照组比较差异均无统计学意义（均 P ＞0．05）。浸润性膀胱癌患者血清中 sFas 和 sFasL含量均显著高于浅表性膀胱癌患者（均 P ＜0．05）;膀胱癌 G3期患者血清中 sFas 和 sFasL 含量均显著高于 G1、G2期患者（均 P ＜0．05）。结论血清中 sFas 和 sFasL 水平可能成为膀胱癌患者病理特征判断以及治疗过程中疗效观察的指标。     

磁共振扩散张量成像在肝脏局灶性病变诊断中的应用

目的：探讨磁共振扩散张量成像（DTI）在肝脏局灶性病变诊断中的价值。方法选取经病理或临床证实的55例患者为研究对象,其中原发性肝癌15例,肝转移瘤7例,肝血管瘤17例,肝囊肿16例。同时,选取20例健康志愿者进行对照。所有受试者均行肝脏常规 MRI 及 DTI 检查,并进行图像后处理,测量平均肝脏表观扩散系数（ADC）值和各向异性分数（FA）值。ADC 和 FA 值均值比较采用两样本 t 检验,P ＜0．05为差异具有统计学意义。结果对照组肝脏平均 ADC 值为（1．513±0．132）×10-3 mm2·s-1、平均 FA 值为0．264±0．064。肝癌组、肝转移瘤组、肝血管瘤组、肝囊肿组、恶性组（包括肝癌组和肝转移瘤组）、良性组（包括肝血管瘤组和肝囊肿组）的 ADC 值分别为（1．395±0．097）×10-3、（1．404±0．034）×10-3、（2．379±0．523）×10-3、（3．645±0．298）×10-3、（1．398±0．081）×10-3和（2．963±0．778）×10-3 mm2· s-1。上述各组的 FA 值分别为0．211±0．031、0．238±0．044、0．258±0．049、0．139±0．045、0．219±0．037和0．203±0．077。肝癌组和肝转移瘤组 ADC 值、FA 值比较差异无统计学意义（P ＝0．816）;肝血管瘤组和肝囊肿组 ADC 值、FA 值比较差异具有统计学意义（P ＜0．001、P ＝0．002）;恶性组 ADC 值比良性组 ADC 值低（P ＜0．001）;恶性组与良性组 FA 值比较差异无统计学意义（P ＝0．469）。结论肝脏 DTI 联合常规磁共振成像序列可获得更加丰富的信息,有助于肝脏局灶性病变的诊断和鉴别诊断。     

峡部裂性与退变性腰椎滑脱 MSCT扫描解剖学因素的对照研究

目的：利用多层螺旋 CT（multi-slice spiral CT,MSCT）对峡部裂性与退变性腰椎滑脱解剖学因素进行对比分析。方法选取108例腰椎滑脱患者,滑脱椎体均为 L4,其中峡部裂性腰椎滑脱（峡部裂组）54例,退变性腰椎滑脱（退变组）54例,均经 MSCT 检查确诊。分别测量2组病例的骶骨倾斜角、腰椎前凸角、椎间关节角度、椎弓峡部宽度、滑脱距离、滑脱指数。结果峡部裂组年龄、腰椎前凸角、椎弓峡部宽度小于退变组,关节突关节面与矢状面夹角、滑脱指数大于退变组（P ＜0．05或 P ＜0．01）;2组骶骨倾斜角差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论峡部裂性腰椎滑脱患者发病年龄早于、滑脱指数大于退变性腰椎滑脱患者;椎弓峡部发育不良或形态改变（纤细）为峡部裂性腰椎滑脱发病的重要因素;椎间关节面与矢状面夹角变小以及腰椎前凸角增大在退变性腰椎滑脱形成中起一定作用。     

纤溶酶原激活物抑制剂-1、脂联素、白介素-1与妊娠期糖尿病的关系

目的：通过检测妊娠期糖尿病（GDM）孕妇血清、脐血、胎盘组织中纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）、脂联素（AP）、白介素-1（IL-1）的表达水平,探讨其与GDM发生、发展的关系。方法选择50例GDM孕妇为试验组,50例正常孕妇为对照组。采用ELISA法测定2组孕妇血清与脐血PAI-1、AP、IL-1表达水平,采用实时定量PCR测定2组胎盘组织中PAI-1、AP、IL-1表达水平。结果试验组血清、脐血、胎盘组织AP表达水平均较对照组显著降低（P＜0．05）,而PAI-1、IL-1表达水平均较对照组显著升高（P＜0．05）。结论AP的低表达、PAI-1与IL-1的高表达可能与GDM的发生、发展有关。     

心理支持治疗对产后抑郁症患者焦虑抑郁情绪的影响

目的 探讨心理支持治疗对产后抑郁症患者焦虑、抑郁情绪的影响.方法 选择30例产后抑郁症患者为研究对象,运用随机数字表法将其分为对照组和研究组,每组15例.对照组仅给予舍曲林治疗,研究组患者则在对照组的基础上加用心理支持治疗.分别采用焦虑自评量表（SAS）和抑郁自评量表（SDS）于干预前和干预3个月后对患者的焦虑、抑郁情绪进行评估,并进行比较.结果 干预3个月后,2组患者SAS、SDS得分均较入组时明显降低,但研究组SAS和SDS得分分别为（45.40±5.10）、（46.00±4.18）分,明显低于对照组的（50.13±5.62）、（50.73±5.06）分,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 心理支持治疗能够明显改善产后抑郁症患者焦虑、抑郁情绪,疗效优于单用舍曲林治疗.     

Galectin-3和 VEGF 在宫颈病变组织中的表达及意义

目的：探讨半乳糖凝集素-3（Galectin-3）和血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达水平与不同病理改变的宫颈组织的关系,两者与宫颈癌临床病理特征的关系及两者的相关性。方法采用免疫组织化学 S-P 法,分别检测 Galectin-3和 VEGF 在慢性宫颈炎（宫颈炎组,15例）、宫颈上皮内瘤变（CIN）（CIN 组,30例）及宫颈癌（宫颈癌组,78例）中的表达;分析 Galectin-3和 VEGF 的表达与宫颈癌临床病理特征的关系。结果宫颈炎组、CIN 组、宫颈癌组 Galectin-3蛋白表达阳性率分别为26．7％、73．3％、87．2％。CIN 组 Galectin-3蛋白表达阳性率明显高于宫颈炎组（P ＜0．05）,宫颈癌组 Galectin-3蛋白表达阳性率明显高于 CIN 组（P ＜0．05）。宫颈炎组、CIN 组、宫颈癌组VEGF 蛋白表达阳性率分别为33．3％、60．0％、76．9％,宫颈癌组 VEGF 蛋白表达阳性率明显高于宫颈炎组（P ＜0．005）。Galectin-3和 VEGF 的表达与年龄、病理学类型、淋巴结转移无关（P ＞0．05）,而与宫颈癌宫颈间质浸润深度、肿瘤直径等有关（P ＜0．05）。Galectin-3与 VEGF 在宫颈癌中的表达呈正相关性（rs ＝0．684,P ＜0．05）。结论Galectin-3和 VEGF 在 CIN 和宫颈癌组织呈高表达;两者可能参与了宫颈癌的发生和进展;与宫颈癌宫颈间质浸润深度、肿瘤直径等相关;两者在宫颈癌组织中存在共表达;可作为宫颈癌组织中的生物标志物。     

系统性红斑狼疮患者抗心磷脂抗体的检测及其临床意义

目的探讨系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）患者抗心磷脂抗体（anti-cardiopin antibody,ACA）的检测及其临床意义。方法采用ELISA法检测69例SLE患者（SLE组）和50例健康体检者（正常对照组）的血清ACA水平,同时对SLE组患者进行抗核抗体（anti-nuclear antibody,ANA）、抗双链DNA抗体（an-ti-double stranded DNAantibody,dsDNA）、尿蛋白定性、补体C3、血小板计数等测定。结果 SLE组血清ACA阳性23例,阴性46例。SLE组血清ACA抗体水平为（13.18±11.53）kRU·L^-1,显著高于正常对照组的（5.01±2.67）kRU·L^-1（P〈0.01）。ACA阳性组ANA平均滴度高于ACA阴性组（1∶2 549.2 vs 1∶1 324.0）,但差异无统计学意义（P〉0.05）。ACA阳性组抗dsDNA、尿蛋白定性阳性率分别为60.9%、65.2%,均显著高于ACA阴性组的34.8%、30.4%（P〈0.05或P〈0.01）。ACA阳性组补体C3、血小板计数分别为（0.43±0.17）g·L^-1、（91.42±16.19）×10^9·L^-1,均显著低于ACA阴性组的（0.59±0.19）g·L^-1、（108.24±22.05）×10^9·L^-1（均P〈0.01）。结论 ACA在SLE的发病及病情发展起了重要的作用。它对SLE的诊断、病情严重程度的评价、判断预后及疗效观察等均有重要的临床意义。     

右旋柠烯对小鼠胃癌COX-2表达及淋巴管生成的影响

目的探讨右旋柠烯对胃癌组织中淋巴管的生长以及环氧化酶-2（COX-2）表达的影响,为癌的防治提供形态学依据。方法将50只昆明小鼠用致癌剂苯并芘（B（a）P）灌胃12周构建小鼠胃癌模型。确定胃癌形成之后将其随机分成治疗组（n=25）、对照组（n=25）。治疗组用5%右旋柠烯灌胃干预;对照组用等量色拉油灌胃。另选取10只昆明小鼠用等量色拉油灌胃作为正常组（n=10）。第24周取材,测量肿瘤体积。采用HE染色观察癌组织的生长、浸润;免疫组织化学S-P法分析COX-2和淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1（LYVE-1）在各组组织及淋巴管中的表达。结果治疗组肿瘤发生率为52%低于对照组的82%（P〈0.05）,其肿瘤体积亦小于对照组[（0.758±0.33）cm^3比（2.124±0.29）cm^3,P〈0.05]。光镜下HE染色可见正常胃壁的层次结构被癌组织破坏,并有大量炎性细胞浸润,对照组癌细胞侵袭范围广而深,多达肌层;治疗组侵袭范围较小,主要限于黏膜及黏膜下层。免疫组织化学染色治疗组胃癌组织COX-2呈弱阳性表达且低于对照组（39%比78%,P〈0.05）,而对照组较正常组表达明显增高（78%比20%,P〈0.05）。LYVE-1的表达符合毛细淋巴管的典型形态特征,治疗组胃癌周边组织微淋巴管与对照组相比管腔较小,微淋巴管密度（LMVD）较少,但与正常组比较明显增多（均P〈0.05）。结论右旋柠烯对肿瘤生长有抑制作用,可降低瘤细胞COX-2的表达并影响淋巴管生成;LMVD和COX-2的阳性表达率均与胃癌的生长浸润有关。     

慢性阻塞性肺疾病急性加重期凝血纤溶状况分析

目的探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）急性加重期患者凝血纤溶异常情况,并探究其临床意义。方法收集COPD患者60例为研究对象（急性加重期患者34例,稳定期患者26例）,并选取50例健康志愿者为对照组;检测所有入选对象的血浆凝血酶原时间（PTT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）、血小板（PLT）、D-二聚体（D-D）和狼疮样抗凝物质（LA）的水平。结果 COPD患者PTT、APTT较对照组明显延长（P〈0.05）,FIB、D-D、LA比值、PLT等凝血指标均明显高于对照组（P〈0.05）。COPD急性加重期D-D值和PaCO2值均明显高于COPD稳定期（P〈0.05）,PaO2明显低于COPD稳定期（P〈0.05）,而LA比值、FIB二者比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 COPD患者血液处于高凝状态,而急性加重期的高凝低纤状态更有利于血栓的形成,对监测COPD病情变化具有重要意义。     

脑苷肌肽注射液治疗新生儿缺氧缺血性脑病的疗效

目的探讨脑苷肌肽注射液治疗新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）的疗效。方法将86例HIE新生儿按随机数字表法分为对照组和治疗组,每组43例。对照组和治疗组在＂三支持、三对症＂治疗的基础上分别给予胞二磷胆碱125mg、脑苷肌肽注射液2mL,均为静脉滴注,1次·d^-1,10-14d为1个疗程。观察2组患儿的疗效（疗效判定指标包括原始反射、意识障碍、肌张力恢复时间及惊厥消失时间）,比较治疗前后新生儿神经行为评分（NBNA）。结果治疗组总有效率（95.3%）高于对照组（72.1%）（P〈0.05）。2组治疗前NBNA评分差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗后治疗组NBNA评分[（36.15±2.24）分]高于对照组[（34.28±2.79）分]（P〈0.01）。结论在常规综合治疗的基础上应用脑苷肌肽注射液治疗HIE的疗效优于胞二磷胆碱。     

高血铅对幼儿神经行为的影响

目的 探讨高血铅对幼儿神经行为的影响.方法选择血铅≥100 μg·L-1的33例儿童作为高血铅组,血铅＜100 μg·L-1的33例儿童作为对照组.采用幼儿行为量表对2组儿童的社交退缩、忧郁、睡眠问题、躯体诉述、攻击、破坏6个行为因子进行评分.结果 高血铅组发生忧郁、攻击的比例分别为45.5%、81.8%,显著高于对照组的12.1%、48.5%（P＜0.01）.高血铅组行为因子总得分为（60.36±27.66）分,对照组为（41.73±23.84）分,高血铅组显著高于对照组（Z=-2.937,P=0.003）;2组社交退缩、忧郁、躯体诉述、攻击、破坏5个行为因子得分比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 高血铅儿童发生神经行为异常较正常儿童增多,对高血铅儿童采取积极有效的预防、干预措施,是儿童健康成长的重要保证.