康复期血浆应用于急性病毒性传染病现状及其治疗新型冠状病毒肺炎前景

随着康复期血浆(convalescent plasma,CP)被成功地用于治疗多种急性病毒性传染病,其独到的治疗技术优势越来越受到肯定和认同。新近在中国武汉发现并鉴定一种命名为2019-nCoV(SARS-CoV-2)的新型冠状病毒,目前暂无特异性治疗其感染的有效手段。本文就CP应用于埃博拉、大流行流感、严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)、中东呼吸综合征(Middle East respiratory syndrome,MERS)的现状作一综述,并对其治疗新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)的前景作一展望。     

SARS-CoV-2抗体标准物质的研制及应用进展

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)引发的新型冠状病毒肺炎(Coronavirus Disease 2019,COVID-19)严重威胁人类健康和公共卫生安全。接种疫苗对有效控制疫情具有重要作用，全球已有150多个SARS-CoV-2疫苗进入临床试验阶段，38个批准紧急使用或上市。中和抗体水平是评价疫苗免疫原性的主要指标，但至今尚无标准化的SARS-CoV-2中和抗体检测方法，不同实验室和不同产品之间的中和抗体水平难以进行横向比较，严重制约疫苗和抗体类治疗药物的研发和评价。随着第一代SARS-CoV-2抗体标准品的快速售罄及SARS-CoV-2值得关注变异株(variants of concern,VOC)不断出现，2022年，WHO与我国同步开展了第二代标准品的研制工作。本文就WHO和我国SARS-CoV-2抗体标准物质的研制及应用进展作一综述。     

严重急性呼吸综合征冠状病毒2核衣壳蛋白的制备及其初步应用

目的 在大肠埃希菌中表达严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,N蛋白),并进行纯化,用于制备SARS-CoV-2检测试剂.方法 将含N蛋白基因的重组质粒pE...     

抗新型冠状病毒抗体样本盘在其胶体金测试卡质量评价中的应用

目的建立抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)抗体样本盘,并应用于SARS-CoV-2抗体胶体金测试卡的质量评价。方法采用新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019,COVID-19)康复者恢复期经病毒灭活的血浆样本建立SARS-CoV-2抗体样本盘,并进行优化。收集国内3个厂家(厂家S、厂家L、厂家H)胶体金测试卡,分别检测样本盘,并提出改进意见,厂家优化改进后,对优化后测试卡进行评价和比较。结果厂家S优化前测试卡的准确度为92.54%,灵敏度为90.78%,特异性为100.00%,约登指数为0.908,但阳性检测线颜色浅,不易辨识;优化后测试卡的灵敏度为95.35%,特异性为98.91%,准确度为97.19%,约登指数为0.943,且显色明显,易于判读。厂家L优化前测试卡检测IgM抗体的灵敏度仅为14.28%,漏检率较高,且显色不明显;优化后测试卡检测IgM抗体的的灵敏度达98.63%,显色明显且快速。厂家H测试卡检测IgG抗体的灵敏度为98.08%,特异性为100.00%,准确度为98.90%,约登指数为0.981;检测IgM抗体的灵敏度为84.50%,特异性为86.49%,准确度为85.71%,约登指数为0.710。结论本实验建立的SARS-CoV-2抗体样本盘可用于SARS-CoV-2抗体检测试剂的质量评价。     

新型冠状病毒肺炎疫情下水务和环境检测实验室的生物安全管理和防控要点

正2020年1月31日和2月1日,美国和我国深圳实验室先后在新型冠状病毒感染者的粪便中检测出新型冠状病毒核酸阳性,2月13日,钟南山院士团队更从粪便中分离出了活的新型冠状病毒,上述发现显示新型冠状病毒不仅可以通过"飞沫传播"和"接触传播",还可能通过"粪口传播"。为防止新型冠状病毒感染的肺炎疫情继续传播和扩散,国家相关部委发布了《新型冠状病毒防控指南》、《公共场所新型冠状病毒感染的肺炎卫生防护     

新冠疫情下城市水系统安全保障与应急建议

正自新型冠状病毒感染肺炎疫情(以下简称新冠疫情)爆发以来,全国各行业都进入一致抗"疫"的关键期。2020年2月1日,生态环境部印发了《关于做好新型冠状病毒感染的肺炎疫情医疗污水和城镇污水监管工作的通知》及《新型冠状病毒污染的医疗污水应急处理技术方案》(试行),安排部署医疗污水和城镇污水监管工作,规范医疗污水应急处理、杀菌消毒要求,防止新型冠状病毒通过粪便和污水扩散传播。此通知和方案一出,便引起水务行业的极大关注,由于非常时期的医疗废水中含有     

新型冠状病毒中和抗体的研发策略及研究进展

新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)已形成全球大流行,对公共健康、社会经济等造成严重负担,迫切需要有效的控制手段。抗体在突发烈性传染病的预防及治疗中已具有良好的应用先例。目前全球有数百个SARS-CoV-2抗体研发项目正采用不同的策略开展研究,其中部分已进入临床。本文从靶标的选择、抗体的筛选技术、功能评价及可能面临的挑战四个方面,对目前SARS-CoV-2中和抗体的研发策略及研究进展作一综述。     

疫情之下地埋式污水处理厂运营与设计应对思考

正新型冠状病毒主要通过飞沫和接触传播,在密闭、不通风的环境可能存在气溶胶传播。2月13日,广东省疫情防控工作新闻发布会上,钟南山院士团队宣布在广州一例确诊病例的粪便中分离出了活的新型冠状病毒(SARS-Co V-2),病毒存在粪口传播的可能。污水通过排水管网进入污水处理厂,存在病毒暴露引发操作人员感染、处理不当造成受纳水体污染等的风险。2月1日生态环境部印发了《关于做好新型冠状病毒感染的肺炎疫情医疗污水和城镇污水监管工作的通     

利用单个B细胞制备人源SARS-CoV-2刺突蛋白单克隆抗体

目的 利用单个B细胞制备人源严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)刺突蛋白(S蛋白)单克隆抗体，并检测其中和活性。方法 采集经2次SARS-CoV-2灭活疫苗(Vero细胞)免疫，且抗体水平较高的人静脉血，用人外周血淋巴细胞分离液分离外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)，经偶联S蛋白的磁珠分选表达S蛋白抗体的单个B细胞。将单个B细胞反转录后，用套式PCR法扩增IgG重链、轻链可变区基因；通过重叠PCR法将可变区基因与CMV启动子及IgG leader序列DNA片段、IgG恒定区及PolyA序列DNA片段连接，构建抗体线性表达盒。将同一B细胞的重链、轻链线性表达盒转染HEK293T细胞，表达人源SARS-CoV-2 S蛋白单克隆抗体。免疫荧光法检测抗体免疫反应活性，假病毒中和试验检测抗体中和活性。结果 共表达了26株SARS-CoV-2 S蛋白单克隆抗体，经Western blot检测，于相对分子质量约55 000和25 ...     

供水企业应对新冠疫情的几项工作

正新型冠状病毒感染肺炎疫情(以下简称新冠疫情)发展至今,就新型冠状病毒是否会随饮用水传播,一直是水务行业,特别是供水行业关注的焦点。不少国内学者通过对文献资料的研究,从病毒特性、现有消毒工艺的机理等方面展开了探讨,但由于对冠状病毒的研究尚不深入,现有水厂工艺对冠状病毒的灭杀效果也缺乏试验和数据支撑,国内尚未形成统一的指导性意见。目前,部分学者和专家认为新型冠状病毒由于不耐氯,且离开宿主无法存活等特点,认为现有水厂的消毒工艺已足以应对,     

SARS-CoV-2疫苗不同动物模型攻毒试验常见问题及考虑

动物攻毒试验作为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARS-CoV-2)疫苗有效性评价的有效手段，选择合适的动物模型及合理试验设计对获取有效性、安全性信息及支持临床试验十分重要。目前，非临床常用动物模型包括转基因小鼠、非人灵长类动物、仓鼠、雪貂等。本文就非临床试验中常用动物模型及其在应用中遇到的问题作一综述。     

SARS-CoV-2收获液滴度稳定性及灭活动力学分析

目的 对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)收获液在2～8℃环境下的滴度稳定性及β-丙内酯灭活剂对病毒的灭活效果进行研究。方法 将3批(批号：202111001、202111002和202111003)SARS-CoV-2收获液于2～8℃放置12 d，每隔3 d(0、3、6、9、12 d)取样，采用Karber法检测病毒滴度；2～8℃过夜平衡的3批病毒收获液按1∶4 000的体积分数加入β-丙内酯进行灭活，在不同的灭活时间点(0、0.5、1、1.5、2、3、4、8、16、24 h)取样检测病毒滴度，取灭活8.0、16、24 h的病毒液进行灭活验证，取灭活24 h的病毒灭活液进行透射电镜观察。结果 2～8℃环境下，SARS-CoV-2的滴度随放置时间的延长不断降低，0～3 d滴度下降不明显，第12天滴度由最初的7.75、6和7.5 lgCCID₅₀/mL降至5.75、4.625和6.25 lgCCID₅₀/mL，表明2～8℃环境下病毒...     

重组SARS-CoV-2蛋白疫苗抗原含量通用检测试剂盒的研制

目的 制备重组严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)蛋白疫苗抗原含量通用检测试剂盒，并进行验证。方法 选用中国食品药品检定研究院(简称中检院)制备的羊抗S蛋白多克隆抗体作为包被抗体，从4株单克隆抗体(14C8、15F9、17A7和20D8)中筛选出1株具有受体结合域(receptor-binding domain,RBD)结合活性高，且广谱抗主要突变株的单克隆抗体作为酶标抗体(用HRP标记)，制备重组SARS-CoV-2疫苗抗原含量的双抗体夹心ELISA法通用检测试剂盒，并采用棋盘滴定法对包被抗体稀释度(1∶125～1∶4 000)和酶标抗体稀释度(1∶250～1∶32 000)进行优化。验证试剂盒的专属性、线性范围、准确性、精密性及耐用性。将制备的通用检测试剂盒分发给12个实验室，检测各实验室自制的不同表达系统(CHO细胞、毕赤酵母、Sf9细胞或大肠埃希菌)和目的蛋白(RBD或S蛋白)的15批重组SARS-CoV-2蛋白疫苗原液(包括11批以WT株为参考序列设计的原液及4批以...     

基于柯萨奇病毒-A5复制子的SARS-CoV-2自扩增RNA疫苗的构建及其免疫原性评价

目的 构建基于柯萨奇病毒-A5(Coxsackievirus-A5,CV-A5)复制子的严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory symptom coronavirus 2,SARS-CoV-2)Delta突变株(B. 1.617.2)自扩增RNA(self-amplifying RNA,saRNA)疫苗，并评价其免疫原性。方法 以含有CV-A5全长基因组序列的质粒为基础，通过In-fusion克隆将SARS-CoV-2Delta突变株S蛋白基因替换不同长度的CV-A5 P1结构蛋白基因，分别构建重组质粒pDelta-S10、pDelta-S5和pDeltaS1(融合多聚蛋白的S-VP1/2A酶切位点上游的氨基酸分别为10、5和1个)。通过线性化重组质粒体外转录获得3种RNA分子Delta-S10、Delta-S5和Delta-S1。将3种RNA分子分别转染HEK-293T细胞，Western blot分析S蛋白的表达，筛选出S蛋白表达量最高的RNA分子，qPCR检测其在HEK-293T细胞中的自扩增。将筛选出的Delta-S用脂质纳米颗粒包装后，...     

春天的脚步近了

正2020年开春,对全球制造业来说是一个多事之春。春节前后,新型冠状病毒疫情肆虐全国,以湖北地区为中心向外传播,化工行业受影响的主要为中小企业。新型冠状病毒肺炎爆发疫情给化工制造业带来哪些影响呢?对整个化工制造业来说,机会又在哪里?     

新型冠状病毒肺炎背景下医务人员对免疫功能受损儿童疫苗接种意见的影响因素分析

目的 分析新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019)背景下医务人员对免疫功能受损儿童疫苗接种意见的影响因素,为免疫功能受损儿童疫苗接种政策制定提供科学依据.方法 采用分层整群随机抽样方式,对2020年1-6月上海儿童医学中心、仁济医院、唐镇和三林社区卫生服务中心医务人员进行问卷调查,通过Lo...     

众志成城克时艰打赢疫情攻坚战给上海化工行业各企业的一封信

正在全国上下和社会各界全力抗击下,我们离打赢新型冠状病毒感染的肺炎疫情防控阻击战越来越近了,决战决胜的关键阶段正在到来。在此重要时刻,我们谨向这段时间以来为防控新型冠状病毒感染肺炎疫情作出巨大努力和重要贡献的上海化工行业全体干部职工,表示诚挚的慰问和由衷的敬意!辞旧迎新之际突如其来的新型冠状病毒感染的肺炎疫情,对各行各业、各级领导干部和全体员     

基于网络药理学探讨双黄连颗粒治疗新型冠状病毒肺炎的可行性

目的:通过网络药理学方法探析双黄连颗粒治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的活性成分、靶点和信号通路,阐明其潜在分子机制.方法:借助中药系统药理学数据库与分析平台检索双黄连颗粒组成药材的活性成分和潜在靶点,GeneCards数据库中获取疾病靶点.使用Cytoscape构建中药-化合物-靶点信息网络.利用String...     

人干扰素α1b体外抗SARS-CoV-2 Omicron株的药效

目的 评价人干扰素(interferon,IFN)α1b体外抗严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)Omicron株的药效。方法 采用CCK-8法检测人IFNα1b原液、人IFNα1b滴眼液、人IFNα1b喷雾剂、瑞德西韦共4种药物的细胞毒性；qPCR法检测人IFNα1b对SARS-CoV-2 Omicron株(BA. 5/BA. 2/BA. 1)的抑制效果。结果 最高浓度(1×10⁷IU/mL)人IFNα1b原液和最高浓度(150μmol/L)瑞德西韦对Vero细胞未达到半数细胞毒性；人IFNα1b滴眼液和人IFNα1b喷雾剂的半数毒性浓度(CC₅₀)分别为29 958和37 550 IU/mL，对Vero细胞具有毒性。人IFNα1b提前孵育2 h后再攻毒，对BA. 1、BA. 2、BA. 5株的半数有效浓度(EC₅₀)分别为9.30、13.38、12.33 IU/mL，瑞德西韦分别为0.314 7、0.291...     

疫情背景下的污水处理厂安全运行与防护工作重点

正随着新型冠状病毒感染肺炎疫情的发展,新型冠状病毒有可能通过粪口传播这一发现,引发了排污水行业极大的关注与讨论。医疗废水处理后进入市政污水管网,经污水处理厂处理后达标排放进入水体。由于目前对新冠病毒传播途径与方式的认识还不够全面,其在环境中的持久性与迁移转化规律还未掌握,这些不确定性给污水处理厂带来了挑战。